用超滤对分子进行分级
通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去
除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过
的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截
留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜，
75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的
溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实
践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍
以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的
分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。 上海超滤浓缩管代理销售哪家好？长宁区默克离心浓缩管哪家好
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。
有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。
研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。
样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 长宁区默克离心浓缩管哪家好一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您知道吗？
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）如果目的样本也不在滤过液中，那么：
a）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 上海Millipore超滤浓缩管授权代理商！
创新的纯化 - 浓缩 - 换液一体化系统
Amicon® Pro 纯化超滤系统
目前的蛋白纯化常常包括很多步骤，用到多种器具，却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险，减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间，默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作，使纯化浓缩蛋白变得简便高效，数据稳定易得。
开放的设计使您可以根据实际需要灵活使用，Amicon®Pro将成为实验室小量蛋白纯化、浓缩、换液各种操作的多功能工具。 超滤浓缩管的主要优势是什么。长宁区默克离心浓缩管哪家好
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对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV（腺相关***）的制备方法供参考。
去污剂因其独特的性质，当浓度大于临界微团浓度（Critical Micelle Concentration, CMC）时，去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象，这有可能会影响去污剂的去除效果。
Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析，可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。 长宁区默克离心浓缩管哪家好
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