浓度：当需要截留的样品浓度很低时，通量通常不受浓度影响。操作过
程中，随着溶质浓度的升高，增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
温度：粗体，作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可
以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。
实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。
pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI
值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。
污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会
在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。 上海Millipore超滤浓缩管授权代理商！金山区默克超滤浓缩管代理商
外泌小体（Exosome）是一种囊泡结构，直径通常在30-150nm，常见于正常体液和病理样本，培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体，其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流，影响和调控着多方面的生理功能，包括**的发生、免疫促进、凋亡调控、血管的生成、炎症的反应及发育和分化等。由于在体液中出现，外泌小体对于临床生物标志物检测来说特别有利，成为体外诊断、biomarker研究的新热点。 江苏超滤浓缩管哪家优惠益启生物公司专业致力于 超滤浓缩管代理销售。
截留
截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近
的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强
度改变的情况下倾向于聚集或改变构象，因此其有效大小可能比 “天然”
分子大恨多，从而导致排阻增加。比如，有些蛋白质在某些缓冲液条件下
会发生多聚化，而另一些则发生解聚（如血红素蛋白）成亚基。这使选择
合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验，我们通常推荐选择
为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先，再根据实际情况加以调整。
核苷酸截留分子量（NCO）
超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸
和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏
过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择
滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。
浓差极化
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞，产生除了膜本身截留分
子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时，会形成相当于第二层滤膜作
用的胶体层，干扰分子通过滤膜，同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分
也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
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特点与优点：
高产：没有样品转移，损失更少
温和：特别的渗滤设计使换液过程更温和
快速：从细胞裂解到纯化、优化一共*需要5次低速离心
灵活：一种离心方法，***支持各种样品制备所需
蛋白缓冲液置换、脱盐和透析
每一种蛋白的制备都是***的，常常需要摸索和优化。应该考虑为特定蛋白选择相应的工具进行换液和透析。您可以从操作较快 Amicon® Pro 的渗滤法或更温和的 D-Tube™透析法中选择更适合样品的操作方法。
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特别推荐应用（提供实验报告作为参考）
Microcon®超滤管：
Microcon®PCR 级超滤管：
• 法医鉴定分析的DNA样品制备
• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换
• 体外合成mRNA的纯化
• 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针
• 游离标记物的去除
• 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究
• 替代乙醇沉淀，离心法高效浓缩基因组DNA
应用指南
典型应用
肽及生长因子浓缩
蛋白浓缩与脱盐
电泳等操作前的蛋白样品浓缩
HPLC前去除蛋白
组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化
生物样本浓缩（抗原，抗体，酶等）
从含有SDS（或无SDS）的缓冲液中浓缩gDNA
核酸浓缩与脱盐（单链或双链核酸）
去除标记核苷酸
去除标记氨基酸
从扩增的DNA产物中去除引物
克隆前去除连接序列（linker） 金山区默克超滤浓缩管代理商
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