Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作
6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 超滤浓缩管服务电话是多少呢。松江区默克离心浓缩管
7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 常州离心浓缩管哪家优惠超滤浓缩管的优缺点您知道吗?
蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过
20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降为推荐离心力的30%-50%
2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩
Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。
特点与优点:
特别的反转离心回收设计,滞留体积很小,样品损失少,
样品回收率通常>90%
浓缩倍数达到50-200倍
Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低
特别设计的死体积防止离干,保证样品回收率和活性
有四种截留分子量供选择
法医gDNA鉴定、PCR产物纯化与小分子分离
Microcon® 超滤管
Microcon®为横膜式超滤管,没有死体积,用于大分子样品的浓缩、脱
盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分
离,比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。 超滤浓缩管的系列有很多种。
Centrifree®过滤器
Centrifree® 过滤器拥有研究及体外诊断证书(美国适用),是为临床研究实验室的样品制备而设计的,能够快速、高效地通过超滤去除小体积(0.15–1.0 mL)血清、血浆等生物样品中的蛋白未结合的小分子溶质。数分钟之内完成精确的分离,样品终体积约为 10μL;不会发生样品稀释、pH 值变化、离子成分变化或未结合小分子溶质浓缩等情况。这种产品使用的是低吸附的再生纤维素膜,亲水膜和 O 型圈,不含增塑剂,确保获得较好的样品回收效果。
优点与应用:
分离血清、血浆等生物学样品中未
吸附的小分子物质
精确的药物结合实验样品制备**
去除生物样品中的蛋白质等大分子
的干扰,减少样品复杂性
测 定 游 离 型 *** 药 物、睾 丸 ***、
甲 状 腺 素 等,用 于 生 物 活 性 研 究、
药物结合分析等新药评估过程 益启生物公司主营 超滤浓缩管销售。嘉定区Merck离心浓缩管咨询报价
那么 超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢?松江区默克离心浓缩管
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过
程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可
以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。
实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。
pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI
值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。
污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会
在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。 松江区默克离心浓缩管
上海益启生物科技有限公司位于漕宝路400号明申商务广场907、908,是一家专业的 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。公司。在益启生物近多年发展历史,公司旗下现有品牌默克密理博,默克, 密理博, 西格玛 ,安倍, 罗氏, 普兰德 等。公司以用心服务为重点价值,希望通过我们的专业水平和不懈努力,将 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。等业务进行到底。自公司成立以来,一直秉承“以质量求生存,以信誉求发展”的经营理念,始终坚持以客户的需求和满意为重点,为客户提供良好的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备,从而使公司不断发展壮大。