取上述200μL细胞液加入小室,下室(培养板)加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同,具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时,依据**细胞类型而定。孵育结束,小心取出细胞小室,吸掉小室上层培养液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%结晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料,立即用棉签擦去滤膜上层的细胞,自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞,随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞,然后用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。细胞检测试剂盒零售多少钱呢?Transwell小室细胞培养代理价
本实验技术要点:
**细胞比较好经过饥饿处理,并且小室上下培养基的FBS有浓度差,以保证细胞可以穿透基质胶。铺细胞要均匀,滤膜底部不能产生气泡,否则会导致细胞染色不均匀,或者局部细胞无法穿透。根据细胞类型选择合适的膜孔径和膜类型。PET膜兼容***,适合绝大多数种类的细胞。侵袭实验的细胞密度比较大,一般在1 0 6cells/cm2左右,不同**细胞的接种密度、培养时间不同,需要参考文献和实验摸索。细胞太少,迁移不过去;细胞太多,可能导致正常组和实验组无差异。 黄浦区培养基细胞培养订购上海益启生物培养小室订购方便。
Milli®-Q纯水机提供的
细胞培养级用水
默克密理博的Milli®-Q纯水机、超纯水机是实验室 用水的优先装备。无论是细胞学实验或是分子生物学实验,品质可靠的水都至关重要,配制各种培养基、缓冲液及试剂都离不开不同级别的***水。
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OmniPur® 品牌的注射用水(Water For Injection, WFI)是***细胞培养用水,符合***美国药典 (USP)WFI规范要求。WFI级水***地应用于细胞培养各环节,包括配制培养基、缓冲液,溶解和稀释干粉试剂等。提供的WFI水从500mL到200L都有,满足您不同操作规模的要求。
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主要优点
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真空/压力泵
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达37L/mino Chemical Duty泵带有耐化学性头和隔膜,以配合腐蚀性化合物合溶剂使用。
两种泵都包含70cm的1/4"管,—TMillex® FAso过滤器,在线防水。两种泵都列入UL认证目录并标有CE字样。
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