抗体基本参数
  • 产地
  • 上海
  • 品牌
  • 上海益启生物
  • 型号
  • COVID19
  • 是否定制
抗体企业商机

非特异性条带    抗体(一抗或二抗)浓度过高                  降低抗体浓度。

SDS可能引起对固定蛋白条带的非特            转膜后,振荡洗涤

异性结合                                在操作过程中不使用SDS。


条带扩散        抗体(一抗或二抗)浓度过高           降低抗体浓度。

               在凝胶上载入过多蛋白                 减少蛋白上样量。


黑色印迹,白色条带,   抗体(一抗或二抗)浓度过高    减少抗体浓度,特别是HRP偶联的二抗。    

或信号快速减少      

免疫沉淀

采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。

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不均匀样品,如混浊液、样品中有颗粒节

样品和标准品混匀不亮分移液器加样不准

移液器在样品和/或标准品使用时存在题留

在解育过程中试剂混合不充分洗涤不充分

液体蒸发

稀释倍数的计算不正确修改实验程序样品处理不正确

处理办法:


确保*使用特定批次的试剂进行实验。

检查所用的实验稀释度(按国说明书推荐的稀释度进行实验)检查横孔板分光光度i计中的渡长。

检查在产品说明书中该批次的阐育时间。(酶底物的解育时间用于20-28℃范围内) 长宁区抗体参数Calbiochem抗体哪家靠谱?

对每种细胞类型或组织焚型单壮优化表解,使用l化试管或低吸附试管。确保所有试剂都是新鲜配制的,且没有污染物。增加洗涤次数。运行一次"无DNA"PCR反应,以确定您的样品是否被核酸污染。

使用PCR的**移液管;在设置PCR之前,使用紫外性照射移液管。采用**移液管,在三个不同的房间/区域进行ChIP、DNA纯化和PCR反应设置,或在遇风期内设置反应。
避免使用票装水或其它形式的预包装水。使用从含有紫外光源的Mll-QR系统中制造的水。使用防雾移液管吸头。

免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP))

免疫沉淀是很有价值的研究工具,目的是研究某一特定蛋白的关键信息,包括:小规模蛋白纯化用于功能研究,N-端序列分析,蛋白-蛋白相互作用的研究,细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素:原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前,确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。 上海WB抗体哪家靠谱?

例如,磷酸特异性抗体可能*与活化的磷酸化蛋白发生反应。如果您的蛋白定位在胞内,则必须对细胞进行裂解。流式细胞实验可能要选择识别细胞表面分子的抗体。如果您的蛋白有三级结构,且掩盖了抗原表位,则必须对样本进行变性,因为有些抗体无法识别自然状态的蛋白。一些抗体*在冷冻或非固定组织中起效,而有些抗体*对经抗原修复后的石蜡切片起效。

目标蛋白的物种来源

比较好选择明确标有目标蛋白种属的抗体。参考抗体说明书或网站信息。 Calbiochem抗体的报价具体是多少呢?青浦区Upstate抗体抗体

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在阴性对照(igG或mockIP)样品中本底较高

抗体过量导致抗体与非靶蛋白结合∶

与珠子的非特异性结合∶

染色质的不完金裂解∶

试剂污染∶

"无DNA" PCR反应显示信号

DNA的较低回收率

ChIP抗体无效或较低亲和力:

ChIP抗体不足:

起始样品不足:

细胞不完全溶解和无效裂解:

交联过度:

交联不足:

亲和力较低或珠子质量较差:

PCR引物:

优化抗体的浓度。

加入-个残***步理,以除这些非特异性蛋白或添加珠子的阻断剂。

优化取解过程,以民得介于200-100bp长度的染色质。 徐汇区H3抗体抗体规格

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