通过改变参数（见第5.3节）和评估他们对梁色质回收率的影响来优化这些步骤。使用机械力，如杜恩斯匀浆器或坡璃珠改善细脆溶辉。优化裂解步要和避免起泡。 在甲醛中培养时间过长可能掩盖经ChIP抗体识别所需要的表位。如果您使用的是单克隆抗体，此问题可能更加严重。过度交联也可能导致超声处理时复合物难以形成。优化交联步骤∶甲醛的**终液度应为1%;您应确定***的交联时间，然后再继绩进行实验。在研究方案的后续步骤中，交联不足可能引起靶蛋白从DNA解离。
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如果吸光度任于1.0，则延长底物的解育时间使用之前应确保所用的试剂已回复至室温（20-28C）。使用不含或含有较任浓度（<0.1%）叠氮化钠、蔬基乙醇或DT的_样温
检查所用约实验稀料度（按照说明书推荐的稀释度进行实验）。检查在产品说明书中该批次的解育时间。（偏底物的前育时间用于20-28℃范围内）;如果吸光系数高于3.0，则缩短底物的第育时间。增加洗海次数，每次洗涤后将液体除净
确认水没有被污染。始终使用重蒸水配制和稀用洗海液。 杨浦区H3抗体抗体代理商Sigma抗体零售多少钱呢？
对您的特定应用，增加（和优化）试剂浓度和培养时间。
检查确保检测试剂按建议的方法正确贮藏和使用。
从抗体缓冲液中除去吐温。
配制少量工作液（1mL），在暗室中加入HRP偶联二抗1mL。
应观察到可见的蓝光。
在再杂交过程中可能有抗原损失。
信号较弱 在凝胶上的蛋白不足 在凝胶上载入更多的蛋白，或在载入之前浓缩样品，或使用免疫沉淀以增加在凝胶运行的中靶蛋白量。
使膜曝光时间延长（1-2小时）。
转移到膜上的蛋白过少--优化转膜条件，如转膜缓冲液pH、膜类型和电压等。
除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。 蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。
关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。
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请查测生产厂家说明书。当在Luminex200仪器上读取分析的读数时，采用4个校准片，根题Luminex推荐的方案调整探针高度至适当位置。当在FLEX0MP3D"仪器上读取分析法的读数时，采用1个校准片，根据Luminex建议的方案调整探针高度至适当位置。当在MAGPK"系统上读取分析的读数时，采用2个校准片，根掘山uminex建议的方案调整探针高度至适当位置。
适当使用封闭剂，且用多道移液器移取液体而不触碰微孔板中的试剂，这样可以遍免孔的交叉污染。增加洗涤次数 Calbiochem抗体哪家靠谱？松江区Abcam抗体抗体批发
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用途极为***的液相悬浮芯片法，是基于Luminex公司开发的xMAP®技术。
多因子检测技术是三种**技术的结合：xMAP®微球、
Luminex液相悬浮芯片仪和分析软件。
Luminex xMAP*微珠免疫检测法的原理微球用不同浓度的红色和红外两种受光染料染色，可产生100种不同的颇色。因此，在一次分析中，每个微球具有一个基于染料浓度的光谱地址"，可在Luminex液相悬浮芯片*中读取和鉴别。这些微球用搓获抗体覆盖，以便特异性结合样品中的靶标分析物"。加入报告荧光标记的检测抗体，以完或夹心ELISA，获得读数。 杨浦区鉴定抗体抗体哪家好
