对于成功的ChIP实验，选择适当的ChIP抗体是**关键的步骤之一。即使是比较高质量的抗体，即在经典的Western blot验证中表现非常好的抗体，也不一定适合ChIP。比较好只考虑使用在ChIP实验中专门验证过的抗体。一般的， ChIP实验之后会用定量PCR（qPCR）来验证某一特定DNA序列是否与靶蛋白有关。研究人员可以采用这种经典方法评估目标蛋白与已知的靶基因之间的相互作用。
ChIP实验可以细分为以下几个主要步骤：
样品制备
蛋白与DNA交联
细胞裂解和染色质片段化
染色质免疫沉淀 Sigma抗体零售多少钱呢？鉴定抗体抗体
酶联免疫吸附实验（ELISA） 是结合了抗体的特异性和简单髓分析法的高灵敏度蛋白检测方法。通过采用抗体-抗原反应，ELISA可以提供抗原或抗体浓度测量。有两种常用的ELISA形式∶双抗夫心EUSA和竞争性ELISA。图解和描述如下B。 实验中**常用的是双抗夹心ELUSA，它用于测定未知样品中的抗原浓度，是**有用的免疫分析法之一。夹心ELISA 快速且准确;并且如果提供纯化的抗原标准品，该分析法可用于生成剂量-反应曲线，用于测定未知样品中抗源的***量。奉贤区CST抗体抗体一级代理Calbiochem抗体哪家靠谱？
ChHPAb+trimethy-istione H3Lys917625）∶使用免gG 或AntrimethyHhistone H3Lys9抗体，与Magna ChIP 试剂盒17-610）一起将超声处理后的NH3T3 L1组胞染色质进行染色质免疫沉淀反应。对获取的trimethy-histone H3ILys9DNA精合片段进行qPCR确认，使用的引物为屋p16启动子附近序列。
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磁珠
**与ChIP实验的A，G，或A/G蛋白Magna ChIP磁珠经过严格优化，用于ChIP实验中收集沉淀复合物，具有速度快，重复性好，效率高的优点。与常规琼脂糖微珠不同，在反应中，Magna ChIP 磁珠可在磁场作用下快速移动至反应器边缘，***降低免疫沉淀复合物的滞留时间和机械压力。
例如，磷酸特异性抗体可能*与活化的磷酸化蛋白发生反应。如果您的蛋白定位在胞内，则必须对细胞进行裂解。流式细胞实验可能要选择识别细胞表面分子的抗体。如果您的蛋白有三级结构，且掩盖了抗原表位，则必须对样本进行变性，因为有些抗体无法识别自然状态的蛋白。一些抗体*在冷冻或非固定组织中起效，而有些抗体*对经抗原修复后的石蜡切片起效。
目标蛋白的物种来源
比较好选择明确标有目标蛋白种属的抗体。参考抗体说明书或网站信息。 上海益启生物的科研抗体销售电话。
利用多肽的不同物理特征，如分子量、电荷和形状，蛋白质复合物可用电泳法（即在凝胶基质上加样并通入电流）分离。以这种方式分离蛋白质的常规方法是SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）。通过“跑胶”，可以了解关于蛋白性质的大量信息；而通过把已
分离的蛋白样品从凝胶转移到固相载体膜上（印迹法）并采用特异性抗体进行检测，可以了解更多信息。在用Western blot检测蛋白时，运用高质量抗体对成功而言是至关重要的。 上海Sigma抗体的供应商。闵行区Upstate抗体抗体联系人
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信号弱
信号高
本底较高
准确度较低（一偶然误差）
计算的教据过高或过任《一系统误差，数据与"标准数据"的偏差）
可能的原因： 实验试剂使用错误实验试剂损坏
所用实验试剂稀释度错误仪器的过滤器选择错误（波长）前育时间过短，温度过低
试剂温度不正确
在较高浓度时，叠氮化钠、燕基乙身或DTT可能干扰过氧化物恃活性。所用实验试剂稀释度错误醇育时间过长，温度过高
洗洛不足洗得污染
试剂或小瓶/试管受到以前实验的污染
所用实验试剂（抗体和等结合物）稀释度错误 鉴定抗体抗体
