除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰,否则您应采用X-ChIP方案,以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。 蛋白G磁珠能结合更大范践的执体,包括小鼠单克境抗体,为达到抗体选择的比较大灵活性,我们推荐使用蛋白A/G混合物(目录号16-663)。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物,必要时重新设计引物。
关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答,请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南(ChIP实验指南)。
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前言
流式细脆术是具有很强统计学功能的技接术,它根据物理特征和焚光信号对悬浮细胞群进行鉴定和分选。在50年前就已经开发了流式细胞分析仪;直至1960年代晚期,这种技术才开始商业化。
流式细胞术定义为在悬浮液中,当粒子(如细胞)通过激光或其它光源时,测量细胞和荧光特性。
根据这些检测,可以对它们之中的特定群体和亚群进行鉴定,甚至可以通过细胞分选进行物理分离;在细胞分选中,根据荧光特征使细胞带电从而发生静电偏移。也可以分析粘附细胞和因体组织,前提是要对它们进行解离,建立单细胞悬浮液。
流式细胞术依赖于悬浮细胞的流体动力学,建立在激光器前通过的单细脆流。通过细胞散射光方式的不同,在千粒子/秒的速度下测定细胞的大小和细胞内的复杂性。然后
把这些拟合数据转化为可定量的和可用于二维(或三维)图像的致据。 上海组蛋白抗体抗体销售Merck抗体上海授权代理商。
我们的技术和科研背景使默克密理博成为高质量抗体的主要设计者和生产者,而不仅*是经销商。毋庸置疑,我们的每个小瓶中的抗体都包含着大量的科学研究成果。
**制备高质量抗体
默克密理博抗体浓缩的是科研成果
**抗原准备与免疫
我们的抗体研究小组一直关注更加新的科研文章和出版物,并与神经学、**学、表观遗传学和细胞信号研究等热门研究领域的前列科学家共同讨论靶点的选择,以鉴别出**有价值的抗原靶点和抗体。
**单克隆抗体的研发
利用多肽的不同物理特征,如分子量、电荷和形状,蛋白质复合物可用电泳法(即在凝胶基质上加样并通入电流)分离。以这种方式分离蛋白质的常规方法是SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法)。通过“跑胶”,可以了解关于蛋白性质的大量信息;而通过把已
分离的蛋白样品从凝胶转移到固相载体膜上(印迹法)并采用特异性抗体进行检测,可以了解更多信息。在用Western blot检测蛋白时,运用高质量抗体对成功而言是至关重要的。 上海Sigma抗体的供应商。
对于单克隆抗体,我们采用的是机器人克隆和筛选系统,该系统可以处理所有杂交瘤的融合和培养。这种高度自动化的流程使用了前列技术,确保达到比较大产量和比较好的一致性。我们通过阵列射流自动化微阵列系统检测融合情况,鉴别阳性克隆,然后用ELISA和Western blot进行再筛查。***,对阳性克隆多次稀释,以分离出比较高质量的产物,直至样本达到**克隆性。这一附加的程序正是默克密理博抗体质量优于竞争对手的原因之一。
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问题 可能的原因 处理方法
印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度,载入较少的蛋白。
印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当,或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。
采用丽春红S染色时, 转膜无效 转膜时,小心除去气泡。
印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形
采用丽春红S染色时, 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备(转膜盒、盒盖、电源)。
印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。
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