每一个孔底部边缘上有一个小平台,移液管的前列在实验操作中不会接触到孔的膜面,从而避免了对细胞单层的意外碰触。 独特设计避免气泡形成 一个特别设计的泪珠状孔降低了在滤膜板下面形成气泡的机率,这种气泡一旦形成将会能影响细胞供养。单孔饲养板上设有缓冲隔板,能够防止培养液的渗漏和交叉污染。 专门的端口使从基底外侧加液更加容易 获得**的顶部和基底外侧加液口提供了接触细胞单层的无污染通道。同时它们也简化了细胞种植、更换培养液和样品分析等一系列程序。上海益启生物培养小室订购方便。长宁区培养小室细胞培养联系方式
PET膜(聚酯)* 用于贴壁细胞的生长,无需胞外基质 这种蚀刻的薄膜式半透明的或者在光学显微镜下是透明的,所以可以对细胞单层提供更好的细胞可视性和监测。经组织培养基处理以促进细胞黏附性和生长 *这些膜均为亲水性膜 多孔插入式细胞培养板 无菌、即用的多孔插入式细胞培养板目前有24孔和 96孔两种。独特的设计,例如顶部辅助和泪珠状的 孔形,使Merck Millipore的板相比常规的多孔插入式 细胞培养板使用更加方便且重复性**提高。 顶部加样保护细胞单层崇明区细胞培养细胞培养联系方式上海益启生物的***询价公司电话。
实验简介: 药物研究包括吸收、分配、代谢、排泄和毒性等多个方面,而吸收是第一步。这个实验在以内皮细胞通透性、药物渗透等为研究方向的课题中很常用。 常见检测细胞: 人结肠腺*细胞系 Caco-2、HT-29、Lovo、SW-480,人结肠上皮细胞 T84,狗肾上皮细胞系 MDCK,猪肾上皮细胞系LLC/PK1 等,主要模型为上皮细胞吸收、血脑屏障。 具体操作: 上皮细胞生长到细胞汇合度达80-90%时开始实验,不要超过90%,否则会影响到后续细胞单层的形成。将细胞均匀接种在小室膜上。对于24孔板和96孔板的接种密度见本文图示。
取上述200μL细胞液加入小室,下室(培养板)加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同,具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时,依据**细胞类型而定。孵育结束,小心取出细胞小室,吸掉小室上层培养液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%结晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料,立即用棉签擦去滤膜上层的细胞,自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞,随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞,然后用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。上海益启生物血清订购方便。
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