对您的特定应用，增加（和优化）试剂浓度和培养时间。
检查确保检测试剂按建议的方法正确贮藏和使用。
从抗体缓冲液中除去吐温。
配制少量工作液（1mL），在暗室中加入HRP偶联二抗1mL。
应观察到可见的蓝光。
在再杂交过程中可能有抗原损失。
信号较弱 在凝胶上的蛋白不足 在凝胶上载入更多的蛋白，或在载入之前浓缩样品，或使用免疫沉淀以增加在凝胶运行的中靶蛋白量。
使膜曝光时间延长（1-2小时）。
转移到膜上的蛋白过少--优化转膜条件，如转膜缓冲液pH、膜类型和电压等。 CST抗体的报价具体是多少呢?Calbiochem抗体抗体咨询报价
在保存抗体时请注意以下几点：
为保持比较大反应性，应按照厂家说明书保存试剂（如，当指定保存温度为2-8℃时，应避免将抗体置于室温下）。保存抗体的经验法则是将其置于非无霜冰箱/制冷机内的严格密封容器中，远离组织固定剂和交联试剂。除非加入稳定蛋白，如BSA（1% w/v），否则抗体不得
在工作液中长期保存。避免长期保存稀释的抗体。保存时遇到的主要问题是细菌或***污染。
如果抗体保存在2-8℃超过2-3天，建议进行过滤除菌和/或加入抑菌剂/防腐剂，如0.05%叠氮化钠或0.1%硫柳汞。 闵行区抗体规格Upstate抗体哪家靠谱？
对于单克隆抗体，我们采用的是机器人克隆和筛选系统，该系统可以处理所有杂交瘤的融合和培养。这种高度自动化的流程使用了前列技术，确保达到比较大产量和比较好的一致性。我们通过阵列射流自动化微阵列系统检测融合情况，鉴别阳性克隆，然后用ELISA和Western blot进行再筛查。***，对阳性克隆多次稀释，以分离出比较高质量的产物，直至样本达到**克隆性。这一附加的程序正是默克密理博抗体质量优于竞争对手的原因之一。
多克隆抗体的研发
多克隆抗体通过快速蛋白液相色谱（FPLC）系统纯化，每个色谱柱不得使用超过10次。采用自动化Westernblot确定进一步的纯化程序。
特殊验证
为了支持多步骤、多应用验证流程，我们建立了一个组织和印迹库，其中有高达1300种裂解液，可以准确判断每种抗体的特异性。
质量审查
验证流程的***一个步骤是由一支**的研究员小组进行质量审查。在抗体投入生产前，该小组会对所有抗体验证数据以及来自参与科研者β测试的数据进行评价。如果抗体不符合**严格的质量标准，即使达到了**初的目标，我们也会果断进行废弃处理。 上海益启订购抗体的服务电话是多少？
除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。 蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。
关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。
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对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析
法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编
号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。
Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤
样本制备
凝胶电泳
转膜
封闭非特异性结合
加入抗体
检测
Western Blot 实验流程图
Troubleshooting
问题 可能的原因 处理方法
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