Merck仪器基本参数
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Heathybran,Alheimer'sbrain健康大脑。_Azheimers bran___健康大脑。Aheimer'brain。 Heathybrin。来自阿尔茨海默氏症患者的人脑样本和来自健康供体的细胞裂解细胞凹蛋白提取试剂(目录号71009)。样品是连续的稀释并通过SDS凝胶电泳分离。 s喱被转移到Immobilone-p膜上。印迹是使用MultiBlot在SNAP i.d.e 2.0系统中进行处理,迷你和Midi镜架及其相应的吸墨纸支架。通过标准免疫检测处理对照印迹所有印迹均用0.5%NFDM封闭并用一级抗Taul(目录号MAB3420)和二级HRP-共轭山羊抗小鼠(AP124P)在以下条件下如上所示。印迹与Luminata“ m Forte一起孵育将HRP基板放在X射线胶片上益启生物公司带您了解细胞分析仪详情。杨浦区Merck手持细胞计数器Merck仪器代理价格

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用SNAP i.d.o 2.0系统 系统设置 1.将SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作台上。2.通过推动管道末端的联接插件,将真空管道连接至系统背面。插入系统基座背面的快速断开接头,直至其滑动。注意:要断开管路连接,请用食指将管路连接器下方的卡舌向上推,然后将其拉出。管出来。3.将管道的另一端连接到真空源。使用一升的真空烧瓶作为疏水阀和一个Millex-FA。过滤器(目录号SLFA05010)可保护真空源不受污染,如下所示。注意:任何可以产生410毫巴(12 inHg)和34 L / min的真空源就足够了。如果是真空如果源的工作温度高于410毫巴,则SNAP i.d.2.0系统将自动调节真空度压力。如果真空源不足,则流经系统的流量可能会不一致,从而导致更长的时间。处理时间和/或抗

盘,请在步骤5之后插入托盘。有关详细信息,请参阅“抗体恢复”部分。 6.在整个表面上涂适量的一抗吸墨纸架的数量(对于MultiBlot为2.5毫升,对于迷你吸墨纸为5毫升,或10 mL用于Midi印迹)。7.在室温下孵育10分钟。解决方案将是吸收到污点固定器中,表面可能会变干。重要提示:请勿在吸尘器清洁后再使用真空吸尘器。孵育10分钟。8.向下压框架并施加真空。等待5-8秒,直到框架完全是空的。9.在连续运行真空的情况下,添加30 mL洗涤缓冲液(MultiBlot为15毫升)。重复洗涤步骤3次以上(总共4次洗涤)。当框架完全为空时,将TURN真空关闭。10.在印迹架的表面上涂适量的二抗(对于多印迹,为2.5 mL,5毫升用于迷你印迹,或10毫升用于Midi印迹)。在室温下孵育10分钟,然后高质量的细胞分析仪,保证您的实验结果。

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中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温,建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥,印迹不会变干,因为溶液包含在框架中。注意:如果长时间处理多个印迹,则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选:如果要回收一抗,请先将抗体回收盘放入底座,然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后,将框架放回底座上,卸下盖子,然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意:SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗,持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5,但将真空时间增加到2分钟,以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架,并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座,确保抗体上的定上海关于细胞计数器的哪家靠谱?静安区Merck仪器商家

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utiBlot框架用于在MultiBlot框架中进行单点印迹时,放置正确处理一次印迹,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井清洁不足确保框架**的所有系统垫片和阀门均处于院长,无碎屑或盐分。清空真空瓶,然后更换串联的Milx9-FA过滤器。可能由于以下原因堵塞了吸盘座:浓度在补充有缓冲剂的缓冲液中使用0.2-0.5%的干奶脱脂/低脂干0.1%Tweens 20表面活性剂,带有新的污点固定器。牛奶太高不兼容的封闭液使用新的吸盘固定器更换为强力封闭液。吸墨纸架的重复使用吸笔座只供一次性使用。请勿重复使用。低信号或低信号初级和/或次级将抗体浓度增加5到8倍。比标准抗体浓度过低免疫检测上下颠倒标记印迹的蛋白质一侧,并确保该污点检测试剂不敏感更换灵敏度更高的检测试剂,例如足够的Luminata用Forte杨浦区Merck手持细胞计数器Merck仪器代理价格

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