有关详细信息，请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离（例如，如果使用其他二抗进行检测），则可以重新检测印迹快速清洗后，立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南，以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体，但与标准品相比，体积更小，浓度更高免疫检测。但是，当使用扩展抗体方案（第12页）时，可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度，体积和时间，其次是较高浓度的二抗，持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9上海益启生物Merck仪器订购方便。崇明区MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck仪器批发
中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温，建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥，印迹不会变干，因为溶液包含在框架中。注意：如果长时间处理多个印迹，则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选：如果要回收一抗，请先将抗体回收盘放入底座，然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后，将框架放回底座上，卸下盖子，然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意：SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗，持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5，但将真空时间增加到2分钟，以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座，确保抗体上的定宝山区Merck仪器哪家优惠上海益启生物WB实验加速器订购方便。
15分钟。图4.扩展孵化（过夜）：SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5％NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒，标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，对于HRP偶联的二抗山羊抗兔（AP132P），将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后，将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化（1小时）：，SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免
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x @ -FAgo过滤器（或等效过滤器）建议在保温瓶和真空源之间使用，例如o保护真空源免受污染。●将真空瓶连接到真空源的真空管●前肢●封闭剂，例如脱脂/低脂干奶（0.5％以下），酪蛋白，牛血清白蛋白（BSA）或其他市售的封闭剂，例如blok * -CH缓冲液（请参阅表5）抗体（单克隆和/或多克隆），检测试剂●洗涤缓冲液：Tris或磷酸盐缓冲盐溶液，pH 7.4，补充了Tween @ 20表面活性剂（TBST）或PBST）●转移蛋白的印迹吸笔座尺寸比较大印迹尺寸（厘米）多印迹4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般准则●如果蛋白质已经转移到已经干燥的PVDF膜上，请用100％重新润湿印迹甲醇，然后在组装前用蒸馏水冲洗。如果蛋白质已转移至硝酸纤维素膜干燥后，用蒸馏水重新上海益启生物超滤杯订购方便。青浦区Merck细胞跨膜电阻仪Merck仪器参数
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