有些铜绿假单胞杆菌的保藏方法,如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。铜绿假单胞杆菌的多聚酶链式反应基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成模板DNA经加热至93摄氏度左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。枯草芽孢杆菌能够产生类似细胞分裂素、植物生长养素的物质,促进植物的生长使植物抵抗病原菌的侵害。发酵乳杆菌菌种
大肠杆菌包括大量的细菌群体,它们表现出高度的遗传和表型多样性。对大量分离的大肠杆菌和相关细菌进行基因组测序表明,需要对其进行分类重组。然而,这并没有做到,主要是因为它在医学上的重要性以及大肠杆菌仍然是至多样化的细菌物种之一:在一个典型的大肠杆菌基因组中,只有20%的基因在所有菌株之间共享。事实上,从进化的角度来看,志贺氏杆菌属的成员(痢疾志贺菌,福氏志贺菌,鲍氏志贺菌和宋内志贺菌)应该被归类为大肠杆菌菌株,这一现象被称为伪装的分类群。同样,大肠杆菌的其他菌株(如重组DNA工作中常用的K-12菌株)也有足够的不同,因此需要重新分类。红白草螺菌菌株枯草芽孢杆菌是一种新型的微生物源生物农药。
大肠杆菌生物学特征:1、理化特性。大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性。大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为F型[1]。
通过枯草芽孢杆菌对菲与苯并芘的吸附及生物降解,以枯草芽孢杆菌为接种微生物,对菲与苯并芘都可进行吸附或生物降解,48h液相PAHs浓度达到平衡时,微生物对菲消除了98%,对苯并芘消除85%;接种的样品48h吸附等温线均呈线形,能较好地符合线性方程;在接种微生物情况下,沉积物与土壤对菲和苯并芘吸附特征均发生较大变化,对菲的吸附量增大约35倍,而对苯并芘的吸附量却降低了2/3左右;未接种微生物的土壤和沉积物对菲解吸率为20%,接种的样品组为2.9%,而对苯并芘的解吸结果与菲相反,未接种的对照组为4%,接种的样品组为l3%。枯草芽孢杆菌有着很好的杀菌作用。
枯草芽孢杆菌提高农作物产品品质和食品安全等方面表现出了不可替代的作用,并大量应用于生物肥料。当作用于作物或土壤时,能够在作物根际或体内定殖,并起到特定肥料效应。目前,微生物肥料在培肥地力,提高化肥利用率,抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收,净化和修复土壤,降低农作物病害发生,促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用。通过枯草芽孢杆菌不同菌株的代谢产物中分离纯化多种有效的抗类菌物质,产生代谢产物,在低浓度下就能够对病原微生物的生长和代谢产生抑制作用,从而来影响病原微生物的生存和活动。铜绿假单胞菌在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。藤仓镰孢菌株
金黄色葡萄球引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右。发酵乳杆菌菌种
大肠杆菌表达系统的组成:(一)表达载体:一个完整的质粒载体需要有:复制起点、启动子、插入的目的基因、筛选标记以及终止子。(二)外源基因:在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因,包括原核基因和真核基因。原核基因可以在大肠杆菌中直接表达,但是真核基因含有内含子,大肠杆菌不能对mRNA进行剪切,从而真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。目的蛋白在大肠杆菌系统表达中的形式有二种。一种是在细胞内表现为不溶性的包涵体颗粒。另一种是在细胞内表现为可溶性的蛋白质。可溶性的目标蛋白质除可存在于细胞质中外,还可借助于本身的功能序列和大肠杆菌蛋白质加工、运输体系,至终分泌到周质空间,或外泌到培养液中。(三)宿主细胞:大肠杆菌蛋白表达过程中很重要的因素就是宿主细胞的选择。对于宿主细胞的选择主要根据宿主细胞各自的特征及目的蛋白的特性。对于是适合目的基因表达的宿主细胞主要有以下要求:①容易获得较高浓度的细胞。②能利用易得廉价原料。③不致病、不产生内毒。④发热量低、需氧低、适当的发酵温度和细胞形态。⑤容易进行代谢调控。发酵乳杆菌菌种
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