纤细青霉

枯草芽孢杆菌是动物饲料中常添加的益生菌种，它以芽孢的形式添加于动物饲料中。枯草芽孢杆菌在动物肠道中复苏增殖后就可发挥其益生特性，包括改善动物肠道菌群、增强机体免疫的能力以及提供多种动物所需的酶类等，可以弥补动物体内源酶的不足，促进动物的生长发育，具有明显的益生作用。枯草芽孢杆菌具有单一菌株，对抗生养素无抗性，对水生动物无毒。在水产养殖中，有两种使用枯草芽孢杆菌的方法。用于水净化，用于改善水质，抑制有害藻类的过度繁殖，消除底部淤积，改良底质，用10倍水稀释浸泡1h后全塘均匀泼洒。口服给药，其用作水生动物的饲料添加剂。添加到鱼饲料中的枯草芽孢杆菌可以改善鱼的胃肠功能，提高饲料利用率，改善肉质，促进生长，并具有良好的防病效果。在铜绿假单胞菌中，噬菌体分型所应用的噬菌体现有24株，分型率达90%。纤细青霉

铜绿假单胞菌含有O抗原(菌体抗原)以及H抗原(鞭毛抗原)。O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。O抗原可用以分型。铜绿假单胞菌的标本采集，分别来自不同影响部位的各种标本，包括血液、尿液、痰标本、脓汁、穿刺液等。还包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。通过染色镜检，铜绿假单胞菌为革兰阴性杆菌，菌体大小(1.5~5.0)um×宽(0.5~1)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，无芽胞，无荚膜。Gillisia limnaea铜绿假单胞菌是假单胞菌目中的一种。

大肠杆菌的培养：将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。将菌种接种至一新鲜培养基上，每萌发一次即为一代，因此，当原始菌种复溶并转至新培养基内生长，即认为已传代一次，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代，直到第3代为工作菌种。菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代。直接从冻存摇的菌甘油放了不少可能会抑制菌的生长，活力差，而且多余的甘油对细菌生长不利，经划板的菌株活力好，可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。

铜绿假单胞菌对化学药物的抵抗力比一般革兰氏阴性菌强大。1：2000的洗必太，度米芬和新洁尔灭，1：5000的消毒净在5分钟内均可将其杀死。0.5-1%醋酸也可迅速使其死亡。有些菌株对磺胺，链霉素，氯霉素敏感，但极易产生耐药性。青霉素对此菌无效，但庆大霉素和多粘菌素B，E，氨基甙类、头胞类等抗生养素作用较明显。联合用药可减少耐药菌株的产生。铜绿假单胞菌是院内影响的常见病原菌，所以消毒措施对预防影响有重要作用。由于铜绿假单胞菌菌型多，与毒力有关的物质也有多种，因此理想的菌苗仍在研制之中。铜绿假单胞菌对抗抵菌药物主要存在产生抗生养素灭活酶或抗生养素修饰酶；改变抗抵菌药物作用的靶位，从而逃避抗抵菌药物的抗抵菌作用；膜屏障与主动外排，限制药物达到其作用靶位。形成生物膜。大肠杆菌（Escherichia coli），又叫大肠埃希氏菌。

大肠杆菌耐药性的产生机制：细菌获得耐药性是因为存在耐药基因、敏感菌一旦通过突变选择或结合，转导或转化就可获得耐药性，而几乎所有的病原菌均可查见耐药质粒、质粒的传递加速了耐药性在各菌株间的传播、大肠杆菌是临诊上由质粒介导耐药性的重要细菌之一。1959年日本Aki-ba等人发现并证实多重耐药性可在大肠杆菌和痢疾杆菌间互相传递、1962年此种传递耐药性的因子被命名为耐药因子或R质粒。1963年Lebek从致病性大肠杆菌中发现了R质粒。1969年，Smith曾亲自服用带有质粒的大肠杆菌，证明R质粒的出现与使用抗s素呈正相关。其后，有很多关于正常人、病人及畜禽R质粒检出情况的报道、现在已知R质粒的宿主普遍，可以在多种菌属中传播，目前已发现携带R质粒的细菌有：葡萄球菌、链球菌、淋球菌、几乎整个肠菌科、假单胞杆菌、流感杆菌等。金黄色葡萄球菌中，腐生葡萄球菌数量更多，一般不致病。巴奈特酵母

枯草芽孢杆菌可以减少对虾病害发生，可以较大提高对虾产量，从而提高经济效益，生物环保。纤细青霉

    冻干粉菌种复苏中注意事项：菌种活化前，如要长期保藏，可将冻干管放在-20度条件下保存。此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能剩菌粉下次使用。冻干管中大部分是用牛奶做保护剂，菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长出，请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间，直至菌种培养出。正常情况下，菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性，所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作，注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作，并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护，防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作，并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级，履行生物安全防护责任及採取必要之措施；并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例」。 纤细青霉

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