弗雷德里克斯堡假单胞菌

金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus），又称金葡菌，是一种常见的革兰阳性菌，普遍存在于空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中。它是一种生物共患病原菌，可导致人和动物的多种疾病，包括伪膜性肠炎、败血症和脓毒症等，严重威胁人类和动物的生命安全。长期以来，青霉素和甲氧西林普遍用于救治敏感菌引起的传染性疾病。随着抑菌药物的大规模使用以及人类的滥用和不合理使用，耐药菌株层出不穷。金葡菌耐药性较为突出，其中以耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-resistantS.aureus，MRSA)危害较大。据报道显示，MRSA传染已经和HBV传染、AIDS并列为世界范围内三大难解决传染性疾病。大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。弗雷德里克斯堡假单胞菌

大肠杆菌也被称为E、coli，是革兰氏阴性，兼性厌氧，棒状的大肠杆菌属细菌，常见于温血生物的下肠。]多数大肠杆菌菌株是无害的，但是一些血清型可以在其宿主中引起严重的食物中毒，并且偶尔会由于食物污染而导致产品召回。无害的菌株是肠道正常微生物群的一部分，可以通过生产维生素K2和防止肠道内病原菌定居使宿主受益，与宿主具有共生关系。在粪便中的大肠杆菌被排出到环境中。该细菌在有氧条件下在新鲜粪便中大量生长3天，但随后其数量缓慢下降。胶冻样类芽孢杆菌菌株枯草芽孢杆菌可提高动物体(人体)内干扰素和巨噬细胞的活性。

铜绿假单胞菌在营养琼脂上，37摄氏度，培养3d，菌体呈杆状，0.61μm×1.22~2.13μm，革兰氏阴性，不产芽胞。当通气足够的时候可以产绿色的色素。如果要持久产绿色的色素，可以在溴化十六烷基铵琼脂培养基上面进行培养。本菌种不能在4-10度条件下储存容易死亡，一般情况下建议在20度以上的温度储存或者直接-80度冷冻储存，或者做成冻干粉在4-10度保存。铜绿假单胞菌属于病原微生物，但是铜绿假单胞菌属于已经去除了致病因子的标准菌种，这个菌种不会具有危害。一般应用于科研研究，例如做抑菌实验的阳性菌种。

    冻干粉菌种复苏中注意事项：菌种活化前，如要长期保藏，可将冻干管放在-20度条件下保存。此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能剩菌粉下次使用。冻干管中大部分是用牛奶做保护剂，菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长出，请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间，直至菌种培养出。正常情况下，菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性，所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作，注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作，并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护，防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作，并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级，履行生物安全防护责任及採取必要之措施；并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例」。 铜绿假单胞菌在365nm紫外灯下显荧光。

大肠杆菌生物学特征：1、理化特性。大肠杆菌是短杆菌，两端呈钝圆形，革兰阴性。有时因环境不同，个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在，但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构，但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛，其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性。大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气，个别菌株不产气，大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物，也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中，甲基红试验呈阳性，吲哚产生和乳糖发酵是阳性（个别菌株表现阴性），维-培试验是阴性，尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性（极个别菌株表现阳性），硝酸盐还原试验表现阳性，氧化酶表现阴性，氧化-发酵试验表现为F型[1]。大肠杆菌是革兰阴性杆菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。解污泥黄杆菌菌株

大肠杆菌是条件致病菌。弗雷德里克斯堡假单胞菌

冻存铜绿假单胞杆菌时，要先消化细胞，将细胞悬液收集至离心管中。1000rpm离心10分钟，弃上清液。沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/毫升左右。将悬液分至冻存管中，每管1毫升。将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。贴上标签，写明细胞种类，冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。按顺序降温，室温→4摄氏度（20分钟〕→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱（－30摄氏度1小时）→气态氮（30分钟）→液氮。注意操作时应小心，以免液氮冻坏。液氮定期检查，随时补充，不能挥发干净，一般30立升的液氮能用1～1.5月。弗雷德里克斯堡假单胞菌

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