冻干粉菌种复苏中注意事项:菌种活化前,如要长期保藏,可将冻干管放在-20度条件下保存。此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能剩菌粉下次使用。冻干管中大部分是用牛奶做保护剂,菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长出,请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间,直至菌种培养出。正常情况下,菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性,所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作,注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作,并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护,防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作,并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级,履行生物安全防护责任及採取必要之措施;并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例」。 可将病原大肠杆菌大致上将其划分为两种 :即人病原大肠杆菌和动物病原大肠杆菌。褪色沙雷氏菌粘质沙雷氏菌菌种
葡萄球菌属因其聚成葡萄串一样而得名。是常见的化脓性球菌。医务人员带菌率高达70%以上。而且可能是耐药性菌株,可成为院内传染的重要传染源。葡萄球菌呈球形或椭圆形。直径约0.5--1μm。经常以葡萄串状排列,有时可能散在、成双、短链状存在。没有鞭毛、没有芽孢,体外培养一般不形成荚膜,在体内却可形成荚膜。革兰染色呈阳性。衰老、死亡、被吞噬细胞吞噬、青霉素等药物作用下,菌体可革兰染色阴性。葡萄球菌对营养要求不高,普通培养基生长良好。需氧或兼性厌氧。在18--40℃均可生长。耐盐性强。在含有10%氯化钠培养基中能生长,可用高盐培养基分离菌种。普通琼脂平板上形成圆形,表面光滑湿润,不透明菌落。典型菌株产生脂溶性的金黄色的色素而使菌落呈金黄色。在血琼脂平板上,因金黄色葡萄球菌能产生溶素,在菌落周围形成明显的透明溶血环。米曲霉平展变种金黄色葡萄球菌中,腐生葡萄球菌数量更多,一般不致病。
在裂殖过程中,枯草芽孢杆菌还会分泌枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,以杀死并抑制其它微生物的定殖。由于不同的枯草菌株表现的抑菌活性和生物活性有很大差别,在实际使用中的防病、促生长效果也会有很大差距。细菌没有孢子,这里指的是芽孢。芽孢是细菌个体在条件不适宜的时候形成的一个休眠个体,以保护个体在不良环境中存活下来。CFU是指检测细菌时,将菌液稀释到一定倍数后,在平板上肉眼能看到的单个细菌个体所产生的菌落数目。说白了,10亿孢子活化之后一定是10亿CFU,而10亿CFU却说明不了它来自10亿孢子,有可能是刚开始1亿个芽孢裂殖几代后的结果。芽孢可以保存菌体刚开始的活性,而细菌菌体裂殖的后代,活性会逐代衰退。这也就是说再好的枯草菌剂也有一定的持效期,想要获得持续的防治效果,就必须持续的施用生物菌剂。
金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:直接计数方法6.2.1吸取上述1:10混悬液,进行10倍递次稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液1mL,分别加人三块Baird一Parker平板,每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收,可将平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。在三个平板上点数周围有混浊带的黑色菌落,并从中任选五个菌落,分别接种血平板,36℃士1℃24h培养后进行染色镜检、血浆凝固酶试验,步骤同增菌培养法。枯草芽孢杆菌可提高动物体(人体)内干扰素和巨噬细胞的活性。
关于铜绿假单胞杆菌加培养基的量放入问题,这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10毫升以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。金黄色葡萄球可以存活于高盐环境,至高可以耐受15%浓度的NaCl溶液。乳酸乳球菌
大肠杆菌是革兰阴性杆菌,周身鞭毛,能运动,无芽孢。褪色沙雷氏菌粘质沙雷氏菌菌种
铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌。在自然界分布普遍,为土壤中存在的较常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有铜绿假单胞菌存在。铜绿假单胞菌存在的重要条件是潮湿的环境。铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa,当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成,意即虚假的单元,是早期微生物学用作描述病菌的。而Aeruginosa则是铜绿(即铜与空气中的氧气、二氧化碳和水等物质反应产生的物质,又称铜锈。化学式Cu2(OH)2CO3),正好表达了这种细菌所产生的青色的色素。绿脓素的生物合成是以群体效应来调控,就像充满囊肿性纤维化病人肺部铜绿假单胞菌的生物膜一样。褪色沙雷氏菌粘质沙雷氏菌菌种
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