沙土保藏法(1)取河沙加入10%稀盐酸,加热煮沸30分钟,以去除其中的有机质。(2)倒去酸水,用自来水冲洗至中性。(3)烘干,用40目筛子过筛,以去掉粗颗粒,备用。(4)另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,加自来水浸泡洗涤数次,直至中性。(5)烘干,碾碎,通过100目筛子过筛,以去除粗颗粒。(6)按一份黄土、三份沙的比例(或根据需要而用其他比例,甚至可全部用沙或全部用土)掺合均匀,装入10×100mm的小试管或安瓿管中,每管装1g左右,塞上棉塞,进行灭菌,烘干。(7)抽样进行无菌检查,每10支沙土管抽一支,将沙土倒入肉汤培养基中,37℃培养48小时,若仍有杂菌,则需全部重新灭菌,再作无菌试验,直至证明无菌,方可备用。(8)选择培养成熟的(一般指孢子层生长丰满的,营养细胞用此法效果不好)优良菌种,以无菌水洗下,制成孢子悬液。(9)于每支沙土管中加入约0.5ml(一般以刚刚使沙土润湿为宜)孢子悬液,以接种针拌匀。(10)放入真空干燥器内,用真空泵抽干水分,抽干时间越短越好,务使在12小时内抽干。(11)每10支抽取一支,用接种环取出少数沙粒,接种于斜面培养基上,进行培养,观察生长情况和有无杂菌生长。 微生物菌剂助力农业绿色发展,提升土壤健康与作物产量。广西微生物菌剂登记
基本原理:微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。保藏方法:传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广。寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感“染”并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。冷冻保藏法可分低温冰箱-20—-30℃。 四川微生物菌剂找哪家微生物菌剂助力土壤改良,提高土壤质量。
放入含有保护剂的安瓿管内,然后用火焰熔封。浸入水中检查有无漏洞。(4)冻结再将已封口的安瓿管以每分钟下降1℃的慢速冻结至-30℃。若细胞急剧冷冻,则在细胞内会形成冰的结晶,因而降低存活率。(5)保藏经冻结至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷冻保藏器的小圆筒内,然后再将小圆筒放入液氮保藏器内。液氮保藏器内的气相为-150℃,液态氮内为-196℃。(6)恢复培养保藏的菌种需要用时,将安瓿管取出,立即放入38—40℃的水浴中进行急剧解冻,直到全部融化为止。再打开安瓿管,将内容物移入适宜的培养基上培养。此法除适宜于一般微生物的保藏外,对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏,而且性状不变异。缺点是需要特殊设备。6.冷冻干燥保藏法(1)准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造,形状可用长颈球形底的,亦称泪滴型安瓿管,大小要求外径6—7.5mm,长105mm,球部直径9—11mm,壁厚0.6—1.2mm。也可用没有球部的管状安瓿管。塞好棉塞,1.05kg/cm2>,121.3℃灭菌30分钟,备用。(2)准备菌种,用冷冻干燥法保藏的菌种,其保藏期可达数年至十数年。
苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis简称Bt)Bt属芽孢菌,能产生晶体是它区别于其他芽孢杆菌的标志。按照早期苏云金芽孢杆菌的作用机制,对不同昆虫有特异毒性的伴孢晶体(parasporalcrystal)被昆虫吞食后,在昆虫中肠特殊pH条件下被溶解释放出杀虫晶体蛋白(ICPs)。然后,在中肠拟胰蛋白酶的作用下,通过剪切被。的ICPs特异地与中肠上皮细胞受体结合,从而使细胞通透性破坏,后导致膜穿孔,使整个细胞代谢失去平衡而导致昆虫死亡。苏云金芽孢杆菌制剂克服了传统化学农药污染环境、危害人畜、易产生抗性等缺点,具有选择性强、安全、原料简单等优点,是目前世界上用途广、产量大的微生物杀虫剂,占微生物杀虫剂总量的90%~95%,主要用来防治鳞翅目、双翅目和鞘翅目的某些种类的害虫。近年来又发现Bt对其它目(如膜翅目、同翅目、直翅目、食毛目、虱目和蚤目)昆虫以及吸虫、鞭毛虫、线虫、蜱螨、原生动物有活性,杀虫谱扩大到昆虫纲的9个目。然而迄今为止,已经发现许多昆虫能够对Bt产生抗性。 微生物菌剂的使用有助于提升农业生产的综合效益。
微生物菌剂是指目标微生物(有效菌)经过工业化生产扩繁后,利用多孔的物质作为吸附剂(如草炭、蛭石),吸附菌体的发酵液加工制成的活菌制剂。这种菌剂用于拌种或蘸根,具有直接或间接改良土壤、恢复地力、预防土传病害、维持根际微生物区系平衡和降解有毒害物质等作用。农用微生物菌剂恰当使用可以提高农产品产量、改善农产品品质、减少化肥用量、降低成本、改良土壤、保护生态环境。按剂型可分为:液体、粉剂、颗粒型;按内含的微生物种类或功能特性可分为:根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。按照复合方式分为:微生物菌剂和复合微生物菌剂(JT微生物菌剂)。 微生物菌剂的使用促进土壤微生物的繁殖和活动,增强土壤功能。昆明中药材微生物菌剂
微生物菌剂在提升农产品品质的同时,满足消费者健康需求。广西微生物菌剂登记
高温会杀死微生物,如果菌剂中含有不耐高温的菌种,那这部分菌种就会失活,效果大打折扣。菌剂与农药、化肥同时施用有时候,我们种植的作物会出现根系发育不良等现象,我们可能会施用菌剂,也可能会施用化肥等帮助作物正常生长。但是,我们一定要记住,为了防止活菌被杀死,菌剂是万万不能和杀菌剂、高浓度肥料溶液混用,另外菌种繁殖需要中性或者弱酸性的环境,所以也不能和强碱性的草木灰混用。因为这些药、肥很容易杀死微生物菌。在施用时,如果我们施用的菌剂与防病虫、除草相矛盾时,较好等到药剂持效期后再用菌剂。如果我们用菌剂来拌种,切忌不要和已经拌好杀菌剂的种子混合使用。菌剂施用在肥力不高的土壤上现在,土壤问题越来越严重,而菌剂也慢慢地得到了不少种植户的认可。但是,不少人进入了另一个误区,以为菌剂是万“能”的,使用了菌剂就不用使用其他肥了,但这是不对的。微生物菌要成活和繁殖,土壤中要有足够的有机质才行,如果土壤中没有有机质,那施用了微生物肥也是白搭,因为菌根本就不会存活。所以,我们单单施用菌剂是不可以的,要先施入有机肥来增加土壤中的有机质,再配合菌剂施用,这样可以有效提高土壤肥力,促进作物正常生长。广西微生物菌剂登记