蛋白纯化仪，蛋白纯化方法之凝胶过滤色谱1.凝胶介质的选择凝胶介质的选择主要是根据待分离的蛋白和杂蛋白的分子量选择具有相应分离范围的凝胶，同时还需要考虑到分辨率和稳定性的因素。比如，如果是要将目的蛋白和小分子物质分开，可以根据他们分配系数的差异，选用SephadexG-25和G-50；对于小肽和低分子量物质的脱盐，则可以选用SephadexG-10、G-15以及Bio-GelP-2或P-4；如果是分子量相近的蛋白质，一般选用排阻限度略大于样品中**高分子量物质的凝胶。具体凝胶过滤色谱介质应用Unique AutoPure®蛋白纯化仪的价格。青海原装蛋白纯化仪生产商
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蛋白纯化仪，纯化方法之凝胶过滤色谱：3、分辨率不高提高装柱质量，使色谱柱装填匀实；提高柱床高度；控制上样体积，比较大上样体积不超过柱床体积5%；控制样品黏度与洗脱溶液黏度保持一致；根据样品特点选择合适的洗脱溶液，调节洗脱溶液的离子强度或亲水性；选择合适的凝胶柱（如何选择请参照上文）4、色谱峰对称性差提高装柱质量，装柱匀实——若柱装的太松，容易引起拖尾，装的太紧，会引起前沿；柱较脏，再生色谱柱5、峰出现的原因及解决方法柱床松动，重新装柱或反向冲洗柱柱筛板堵塞，超声清洗筛板柱干裂，重新装柱
蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术：流动相的选择离子交换色谱的流动相必需是有一定离子强度的并对pH有一定缓冲能力的溶液。为了避免目的蛋白失活，使用缓冲液可稳定流动相的pH，使之在色谱过程中不发生明显变化，同时可稳定目的分子上的电荷量，保证色谱结果的重要性。选择缓冲液一般按照以下原则：阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液，可用柠檬酸盐、磷酸盐、醋酸盐、甘氨酸盐等；阴离子交换剂应选用阳离子缓冲液，可用烷基胺、Tris、氨基乙醇胺、乙二胺、咪唑等；起始缓冲液的浓度应尽可能低（<100mmol/L）这样可以使色谱柱上更多的吸附分离物质；缓冲液应不含会影响被分离物质活性和溶解度成分，洗脱时尽量不采用pH梯度洗脱，色谱柱的选择，离子交换色谱通常选用粗短柱，即高径比小的色谱柱。典型的离子交换柱高度在5~20cm，高径比一般小于5。如果需要增加离子交换剂的体积，只能从增加柱的直径而不能增加其高度。如果是连续梯度洗脱，可以适当增加柱的长度。Unique CDSystem是一款功能强大、性能先进、高稳定性的色谱数据管理系统。
蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术：案例介绍 6.选择比较好线速，用0.5mol/LNaOH冲洗柱，冲洗3~5体积；7.接着用超纯水冲柱，冲洗10柱体积，至pH显示接近超纯水pH。柱的平衡20mmol/L磷酸盐缓冲液，pH6.5，用10柱体积平衡缓冲液平衡柱子，直至pH及电导率监控显示与平衡缓冲液的pH及电导一致。加样根据柱体积及装柱的比较大流速确定上样流速，上样流速不超过装柱比较大流速的75%，同时，上样流速也要尽可能低，保证样品和介质充分发生作用。洗脱上样结束后，用平衡缓冲液冲洗1~2柱体积，使UV280响应信号重新回到基线。之后用含有0.5mol/LNaCL的溶液洗脱，冲洗2~3柱体积，收集色谱峰。蛋白纯化仪的应用原理。四川官方授权经销蛋白纯化仪
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蛋白纯化仪，高压制备液相色谱，蛋白质的产率和纯度是衡量纯化是否成功的重要指标。除有效的色谱分离外，配置良好、可靠的仪器也能影响纯化的成功。制备型反相液相色谱由于具有**离能力，经常被用做多肽和小分子亲水蛋白纯化流程的***一步。虽然大家都知道反相液相色谱所用的溶剂条件会使蛋白结构变性，但也能通过调节适当的条件再使其复性，特别是小分子蛋白，Unique AutoPrep高压制备液相色谱可以自动化完成样品进样、分离纯化、目标组分收集的操作，Unique CDSystem色谱工作站软件可执行仪器控制，纯化方法编辑及自动运行，自动进样、自动组分收集，数据采集、保存和管理等功能。青海原装蛋白纯化仪生产商
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