上海楚知生物Unique AutoPure®蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:常见问题分析二、纯化后的蛋白收率较低怎么办?调整样品pH,使样品pH与起始缓冲液pH保持一致;改变洗脱模式,如将线性梯度模式改变为阶段性梯度洗脱;改变洗脱方法,如将pH洗脱方法改为盐梯度洗脱方法;改变洗脱强度。三、样品过于粘稠怎么处理?样品过于粘稠可能是由于含有的蛋白太多,或者含有大分子量的核酸分子,通常有以下解决方法:增加裂解前稀释细胞所用体积;增加裂解时间,直至黏度下降,或者增加DNase和Mg2+的剂量;增加机械裂解细胞的效率;降低上样流速。蛋白纯化仪哪个品牌可靠?甘肃高级蛋白纯化仪市场前景
上海楚知生物Unique AutoPure®蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:常见问题分析一、纯化后样品纯度不高怎么办?1.若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大,目标蛋白通过穿透步骤获得,通过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小,目标蛋白通过洗脱步骤获得,过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;再调节洗脱溶液的离子强度和pH,使目标蛋白与杂蛋白逐渐分离;选择合适的离子交换填料及粒径;柱没有经过起始缓冲液的充分平衡;降低洗脱流速;调整样品溶液黏度。系统稳定蛋白纯化仪代理销售价格支持 Column 和 ByPass 功能,可实现层析柱正向、反向冲洗的蛋白纯化仪。
蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:案例介绍,离子交换是蛋白纯化中的重要手段,即可以用于捕获阶段,也可以用于精纯阶段。预处理和装柱1.将超纯水与沉降胶按1:3比例悬浮,轻轻搅匀;2.将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,排除筛板和管道中气泡;3.通过玻璃棒引流将悬浮胶导入色谱柱,在柱上端补充部分超纯水,搅匀,装上适配器;4.将柱出口端与色谱设备连接,以0.2MPa恒压装柱,装填至恒定的柱床高度,标记柱床胶面位置,关闭泵,松开适配器,降低适配器至胶面下2mm处,继续装填,待柱床高度稳定后,标记柱床胶面位置,降低适配器至柱上标记柱床位置下2mm。固定适配器,继续装填2~3柱体积;5.确定柱体积,测量柱高,计算柱体积及记录装柱时的比较大流速;
蛋白纯化仪,蛋白纯化方法之凝胶过滤色谱1.凝胶介质的选择凝胶介质的选择主要是根据待分离的蛋白和杂蛋白的分子量选择具有相应分离范围的凝胶,同时还需要考虑到分辨率和稳定性的因素。比如,如果是要将目的蛋白和小分子物质分开,可以根据他们分配系数的差异,选用SephadexG-25和G-50;对于小肽和低分子量物质的脱盐,则可以选用SephadexG-10、G-15以及Bio-GelP-2或P-4;如果是分子量相近的蛋白质,一般选用排阻限度略大于样品中**高分子量物质的凝胶。具体凝胶过滤色谱介质应用蛋白纯化仪,蛋白纯化系统 ◆ Unique AutoPure®系统。
于分子筛(凝胶过滤层析)蛋白纯化仪系统的应用领域:分子筛(凝胶过滤层析)蛋白纯化系统的应用领域分子筛层析也并非一无是处,其应用领域主要包括以下方面:1)脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用分子筛层析除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速,蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易失活,样品体积可达柱床体积的25%-30%,为了防止蛋白质脱盐后溶解度降低会形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸铵等挥发性盐类缓冲液使层析柱平,然后加入样品,再用同样缓冲液洗脱,收集的洗脱液用冷冻干燥法除去挥发性盐类。蛋白纯化仪的配套有哪些?系统稳定蛋白纯化仪代理销售价格
用于小分子、天然产物等药物等的分离纯化的高压制备液相色谱。甘肃高级蛋白纯化仪市场前景
AutoPure 蛋白纯化仪系统:产品特点及优势: – 低脉动高精度双柱塞输液泵 ,保证***的分离重现性 ;– 全系统与液体接触的地方均由生物兼容性材料组成、符合FDA、USP VI等相关法规要求 ;– DAD全谱直读检测器,避免了传统的机械切换式检测器所带来的不稳定性及高故障率 ;– 固定波长检测器灯为长寿命LED等,寿命大于8000小时,降低维护成本 ;– **技术紫外检测器流通池,低死体积、低峰拓展,提高了色谱分离度 ;– 高灵敏度在线pH、电导率、紫外检测器,低死体积、低峰拓展,提高了色谱分离度 ;– 集中了buffer选择阀,自动进样阀、柱位阀等自动化组件,提高了纯化的自动化程度 ;– 具有柱前、柱后、压差报警,气泡传感器检测等功能,极大的保护了系统及层析柱的安全性 ;甘肃高级蛋白纯化仪市场前景
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