于分子筛(凝胶过滤层析)蛋白纯化仪系统的应用领域:分子筛(凝胶过滤层析)蛋白纯化系统的应用领域分子筛层析也并非一无是处,其应用领域主要包括以下方面:1)脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用分子筛层析除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速,蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易失活,样品体积可达柱床体积的25%-30%,为了防止蛋白质脱盐后溶解度降低会形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸铵等挥发性盐类缓冲液使层析柱平,然后加入样品,再用同样缓冲液洗脱,收集的洗脱液用冷冻干燥法除去挥发性盐类。Unique AutoPure®蛋白纯化仪的价格。广东通用蛋白纯化仪代理销售价格
我们的产品有Unique AutoPrep蛋白纯化系统,Unique AutoPrep高压制备液相色谱主要应用于小分子、天然产物等药物等的分离纯化;UniqueAutoPrep系列全自动制备液相色谱系统,功能强大,性能稳定可靠。不论是每天只需处理少量样品,还是需要高通量纯化。UniqueAutoPure制备液相色谱系统使您可快速制备宝贵且复杂的混合物并获得高纯度、高回收率、以及完全可信结果。UniqueAutoPrep制备液相色谱系统由进样器,制备色谱主机,制备色谱柱和组分收集器组成,可以自动化完成样品进样、分离纯化、目标组分收集的操作,UniqueCDSystem色谱工作站软件可执行仪器控制,纯化方法编辑及自动运行,自动进样、自动组分收集,数据采集、保存和管理等功能。湖南原装蛋白纯化仪生产商选蛋白纯化仪应该注意什么?
蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:离子交换剂是由不溶于水的网状结构高分子聚合物骨架构成,骨架 上有许多共价结合的带电基团,如果侧链是带正电基团,就可与带 负离子相结合,称为阴离子交换剂,吸附带负电蛋白质。如果侧链是带负电的基团,则称为阳离子交换剂。强离子 交换树脂在宽 pH范围内保持离子化,而弱离子交换树脂只在窄 pH 值内离子化。绝大多数重组蛋白纯化都要用到离子交换。离子交换色谱的基础是高分辨率,可以直接放大规模应用在工业上,柱再生容易,还可以使蛋白浓缩。大多数蛋白质的静电荷是负值,因此阴离子交换色谱的应用**为***。
蛋白纯化仪设备使用注意事项:1.为了避免蛋白质变性,不要对样品剧烈搅动和反复冻融。2.缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环。3.在纯化分离过程中,均必须时刻对它的稳定性注意维护,使它的活性得到保护,要注意避免蛋白质的氧化,避免重金属对目标蛋白的破坏,避免微生物生长,避免蛋白酶对目标蛋白的降解。4.尽可能置于冰上或者在冷库内进行操作。5.蛋白浓度不要太稀。6.除非是进行聚焦层,否则需要合适的pH环境,防止所使用的缓冲溶液pH与pI相同,使蛋白质的沉淀得以避免。蛋白纯化仪的配套有哪些?
蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:流动相的选择离子交换色谱的流动相必需是有一定离子强度的并对pH有一定缓冲能力的溶液。为了避免目的蛋白失活,使用缓冲液可稳定流动相的pH,使之在色谱过程中不发生明显变化,同时可稳定目的分子上的电荷量,保证色谱结果的重要性。选择缓冲液一般按照以下原则:阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液,可用柠檬酸盐、磷酸盐、醋酸盐、甘氨酸盐等;阴离子交换剂应选用阳离子缓冲液,可用烷基胺、Tris、氨基乙醇胺、乙二胺、咪唑等;起始缓冲液的浓度应尽可能低(<100mmol/L)这样可以使色谱柱上更多的吸附分离物质;缓冲液应不含会影响被分离物质活性和溶解度成分,洗脱时尽量不采用pH梯度洗脱,色谱柱的选择,离子交换色谱通常选用粗短柱,即高径比小的色谱柱。典型的离子交换柱高度在5~20cm,高径比一般小于5。如果需要增加离子交换剂的体积,只能从增加柱的直径而不能增加其高度。如果是连续梯度洗脱,可以适当增加柱的长度。英赛斯Unique AutoPure®蛋白纯化仪质量怎么样?浙江系统稳定蛋白纯化仪生产商
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蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:案例介绍,离子交换是蛋白纯化中的重要手段,即可以用于捕获阶段,也可以用于精纯阶段。预处理和装柱1.将超纯水与沉降胶按1:3比例悬浮,轻轻搅匀;2.将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,排除筛板和管道中气泡;3.通过玻璃棒引流将悬浮胶导入色谱柱,在柱上端补充部分超纯水,搅匀,装上适配器;4.将柱出口端与色谱设备连接,以0.2MPa恒压装柱,装填至恒定的柱床高度,标记柱床胶面位置,关闭泵,松开适配器,降低适配器至胶面下2mm处,继续装填,待柱床高度稳定后,标记柱床胶面位置,降低适配器至柱上标记柱床位置下2mm。固定适配器,继续装填2~3柱体积;5.确定柱体积,测量柱高,计算柱体积及记录装柱时的比较大流速;广东通用蛋白纯化仪代理销售价格
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