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STAT2是I型干扰素(IFN-α/β)信号传导通路的关键转录因子,在介导抗病毒免疫和抗增殖信号中发挥重要作用。STAT4和STAT6可分别受到IL-12和IL-4的唤醒,是免疫应答调控的中心调节因子。除了调节免疫应答作用外,STAT1也能抑制瘤细胞增殖,并促进瘤细胞凋亡。与STAT1相反,STAT3和STAT5蛋白都是JAK-STAT信号通路的下游致病介导因子,而该通路能够促进细胞增殖和存活。STAT3控制着细胞周期进程和抗细胞凋亡,因此,常与多种人类病症的发展和不良预后有关。除了参与病症进程,STAT3也参与类风湿性关节炎、克罗恩病和炎症性肠病等自身免疫和炎症疾病进展。因此,STAT3已成为具有吸引力的免疫以及炎症疾病治理靶点,开发抑制剂作为STAT3相关的疾病治理成为重要的药物研究方向。CCCP 是氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂。Y-27632厂家供应

CCK-8试剂盒是CellCountingKit的简称,是一种应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其基本原理是:该试剂中含有WST-8(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8属于MTT的升级产品,在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(Formazan),反应机制如下图所示。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。即生成甲臜颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。无锡Acetylcysteine (乙酰半胱氨酸)CCK-8试剂对细胞的毒性非常低。

CCK-8试剂盒细胞毒性试验:1、接种细胞悬液100µl(5000个/孔)于96孔板,预先置于37℃,5%CO2饱和湿度的培养箱内培养。2、加入不同浓度的毒性物质。3、37℃培养箱中培养,加入毒性物质的培养时间,要看毒性物质的性质和细胞的敏感性,一般要根据细胞周期来决定,起码要一代以上的时间。4、加入10ulCCK-8,由于每孔加入CCK-8量比较少,有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀,同时要注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数。

CCK-8试剂盒操作说明:制作标准曲线(测定细胞具体数量)。1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。2、按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。3、接种后培养2-4h使细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)抑制剂的产量逐年增加,因为需求大。

早期的STAT3抑制剂是一种分子探针,包括肽、拟肽和寡核苷酸,虽然提出了阻断STAT3的可行策略,但仍存在稳定性差、亲和力低、细胞渗透性差、生物利用度低等多种局限,限制了进一步临床发展。肽和寡核苷酸容易引起宿主免疫反应;拟肽是初类靶向STAT3的抑制剂,但是没有分子成功进入临床;非肽类小分子具有多种优点而使得科学家致力于STAT3小分子抑制剂的开发,已有许多小分子成功进入用于瘤治理的临床试验。根据作用机制,直接STAT3抑制剂可以分为阻断STAT3磷酸化、乙酰化、二聚化、核转位以及STAT3的DNA结合活性;根据来源,STAT3抑制剂可分为天然的、半合成的、合成的;根据结合位点,STAT3抑制剂可分为N端结构域、Cys和p-Tyr、SH2结构域、DNA结合域抑制剂。CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应。镇江Stattic抑制剂

Acetaminophen是选择性环氧合酶-2 (COX-2) 的抑制剂。Y-27632厂家供应

CCK-8试剂盒优点:使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;CCK-8法能快速检测;CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;CCK-8法的重复性优于MTT法,MTT实验生成的formazan不是水溶性的,需要使用DMSO等有机溶剂溶解;而本方法产生的formazan是水溶性的,不只省去了溶解步骤,更因此而减少了该操作步骤带来的误差;CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取测定时间,与MTT方法相比线性范围更宽,灵敏度更高;CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。Y-27632厂家供应

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