蛋白酶抑制剂Cocktail有哪些优势?回答:针对多种氨基酸的靶点,对目的蛋白进行多方位的保护,使其免受内源性蛋白酶的降解,蛋白的得出率较高,提高实验效率。可以配合细胞裂解液一起使用吗?回答:可以,这样可以充分的裂解细胞或组织中的蛋白,有效降低蛋白质的降解。 为什么需要用DMSO溶解?可否换成其他溶剂?回答:蛋白酶抑制剂Cocktail较易溶解于DMSO,且DMSO通常不会影响实验结果,而且性质稳定,利于保存和运输。因此暂不考虑其他溶剂。实验时误将其放置常温下,会不会造成试剂变质?回答:短时间放置于常温下是可以的,不会造成试剂变质,因为蛋白酶抑制剂通常比较稳定。如果实验需要在常温下进行,建议将其置于冰块操作,用毕后迅速放置-20℃保存。同时应尽量避免反复冻融。Dexamethasone (Hexadecadrol) 是一种糖皮质受体激动剂。龙泉SB 202190
STAT3介绍:信号转导和转录唤醒因子(SignalTransducerandActivatorofTranscriptionSTAT)属于细胞质转录因子家族蛋白,负责胞外细胞因子和生长因子信号转导以及基因转录的唤醒。STAT具有信号转导和转录唤醒双重功能,当细胞因子或生长因子唤醒相应受体后,STAT蛋白被唤醒,将胞外信号转入细胞核内,从而调控相关基因的转录与表达。在哺乳动物细胞中有7个STAT家族成员,包括STAT1,STAT2,STAT3,STAT4,STAT5α,STAT5β,STAT6,它们具有20-50%的同源性。细胞周期控制、细胞存活和免疫应答等许多相关基因受到STAT蛋白的调控。溧阳Z-VAD-FMKAcetaminophen 是一种有效的肝 N-乙酰转移酶 2 (NAT2) 抑制剂。
目前,大部分直接靶向STAT3的抑制剂是靶向SH2结构域的化合物,因为SH2结构域在STAT3活化中的发挥关键作用。鉴于STAT1在瘤细胞增殖抑制中具有一定重要性,因此STAT3抑制剂应该不会对与STAT1密切相关蛋白的活性产生影响,且STAT1和STAT3的SH2结构域具有很大的相似性。由于只靶向SH2结构域并不能完全抑制STAT3活性,因此开发同时靶向STAT3的DBD、LD、CCD等结构域以克服靶向SH2结构域小分子的局限是重要的STAT3抑制剂开发方向。除了直接抑制STAT3活性,降解STAT3蛋白也是另一个有效的瘤治理方案,然而,开发靶向STAT3的PROTACs相比于小分子抑制剂更具挑战性。
细胞或组织等提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。磷酸酶抑制剂混合物可以有效抑制常见磷酸酶对于蛋白的去磷酸化作用,保持蛋白原有的磷酸化状态。为经优化和测试的用于动物细胞或组织、细菌以及植物蛋白提取的磷酸酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。抑制剂(又称为缓聚剂)是一种用来阻滞或降低化学反应速度的物质。
STAT2是I型干扰素(IFN-α/β)信号传导通路的关键转录因子,在介导抗病毒免疫和抗增殖信号中发挥重要作用。STAT4和STAT6可分别受到IL-12和IL-4的唤醒,是免疫应答调控的中心调节因子。除了调节免疫应答作用外,STAT1也能抑制瘤细胞增殖,并促进瘤细胞凋亡。与STAT1相反,STAT3和STAT5蛋白都是JAK-STAT信号通路的下游致病介导因子,而该通路能够促进细胞增殖和存活。STAT3控制着细胞周期进程和抗细胞凋亡,因此,常与多种人类病症的发展和不良预后有关。除了参与病症进程,STAT3也参与类风湿性关节炎、克罗恩病和炎症性肠病等自身免疫和炎症疾病进展。因此,STAT3已成为具有吸引力的免疫以及炎症疾病治理靶点,开发抑制剂作为STAT3相关的疾病治理成为重要的药物研究方向。呋喃并萘醌化合物Napabucasin(37)是一种靶向STAT3的干扰剂。上海MCE抑制剂
CCK-8的培养时间一般为1-4小时,在培养30分钟左右即可取出肉眼观察显色程度。龙泉SB 202190
CCCP 是氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂。CCCP 诱导 PINK1 唤醒,促进 Parkin 在 Ser65 位点磷酸化。RSL3 ((1S,3R)-RSL3) 是一种谷胱甘肽过氧化物酶 4 (GPX4) 的抑制剂 (ferroptosis 激动剂),可降低 GPX4 的表达,诱导头颈部细胞的肥大性死亡。在 HN3 耐受细胞中,可增加 p62 和 Nrf2 的蛋白水平,使 Keap1 灭活。Mitoquinone mesylate是一种基于TPP的线粒体靶向抗氧化剂,可防止氧化损伤。Acetaminophen (Paracetamol) 是选择性环氧合酶-2 (COX-2) 的抑制剂,IC50 值为 25.8 μM。Acetaminophen 是一种有效的肝 N-乙酰转移酶 2 (NAT2) 抑制剂。Acetaminophen 是普遍使用的解热和止痛剂。龙泉SB 202190
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