缓冲溶液是许多生化反应、生产、实验过程中的重要溶液,对稳定溶液的酸碱度有重要的影响。本文以**常见的几种缓冲体系——磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)-HCl缓冲溶液、羟乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(简称HEPES)缓冲溶液为例,介绍缓冲溶液的组成、缓冲原理及其在生物化学方面的应用。HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。AVT长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐!登记号HEPES批发
Tris-HCl缓冲液缺点:1、温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大,稀释十倍,pH值的变化大于0.1;3、对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点:pKa值介于6.0和8.0之间;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;对生化反应影响有限,可耐化学和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;有极低的可见光和紫外光吸收;离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点:如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果;而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳;HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。供注射用HEPES实验室采购GMP条件下生产注射级HEPES!
在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。
生物缓冲剂在生物化学研究中有着重要的意义,在免疫印迹、生物芯片及生物杂交等实验及体外诊断、生物医药等行业中的应用非常***。注射级氨丁三醇缓冲液优点如下:1.Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液,应用范围广;2.Tris缓冲液对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀;3.Tris在水中溶解度高,对很多酶的反应是惰性的;4.Tris缓冲能力高,在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力;5.Tris缓冲剂应用***,在生物化学、分子生物学、体外诊断、化妆品、涂料等领域发挥重要作用。注射级,低内***、国产化稳定供应、高性价比注射级HEPES找AVT!
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生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲液都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。登记号HEPES批发
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