病理实验外包,病理染色组织处理的要求:恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备的过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫,防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所需的抗原,反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压,在上述区域易出现假阳性结果。组织及时取材和固定组织标本及时的取材和固定是做好免疫组化染色的关键第一步,是有效防止组织自溶坏死,抗原丢失的开始,离体组织应尽快的进行取材,比较好2h内,取材时所用的刀应锐利,要一刀下去切开组织,不可反复切拉组织,造成组织的挤压,组织块大小要适中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切记取材时组织块宁可面积大,千万不能厚的原则,(也就是说组织块的面积可以大到3cm×5cm,但组织块的厚度千万不能超过0.2cm,否则将不利于组织的均匀固定)。固定液快速渗透到组织内部使组织蛋白能在一定时间内迅速凝固。从而完好的保存抗原和组织细胞形态。病理实验外包,靠谱的染色服务,快速高效实验。上海靠谱的病理实验外包
病理实验外包,病理染色常见染色介绍透射电镜检测:通过电子束穿透细胞和组织,从而可以观察细胞内的超微结构。其放大倍数更大,真空要求也更高。透射电子显微镜可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2nm的亚显微结构或超微结构。电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的,光学显微镜的分辨率为0.2μm,透射电子显微镜的分辨率为0.2nm,也就是说透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000倍。透射电镜的电子束通过样品后由物镜成像于中间镜上,再通过中间镜和投影镜逐级放大,成像于荧光屏或照相干版上,分辨细微物质结构;能在看到表面的图像的同时也看到内层物质。用于******电镜检查的标本必须制成50~100nm的超薄切片。常用的切片方法有:超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于液体样品,通常是挂预处理过的铜网上进行观察。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。吉林病理实验外包选择病理实验外包检测那些事儿,南京英瀚斯生物。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍甲苯胺蓝染色:甲苯胺蓝(Toloniumchloride),是一种化合物,分子式为C28H20N2O10S2·2Na,分子量为656.62,甲苯胺蓝深绿色粉末,具古铜色光泽,易溶于水,呈蓝紫色溶液。微溶于醇呈蓝色,极微溶于氯仿,几乎不溶于醚。商品大部分为氯化锌复盐。主要用于氧化还原指示剂。用于眼科检查角膜缺陷和损伤部分,组织化学中用于测定脱氧核糖核酸和诊断白喉。甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。软骨基质对甲苯胺蓝的异染性,是因为软骨基质的主要成分是软骨黏蛋白、多糖物质,而酸性硫酸根与嗜碱性染料有亲和力。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍TUNEL染色:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。实验步骤使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包的条件,南京英瀚斯。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍普鲁士蓝染色:普鲁士蓝染色(Prussianbluereaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁**钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁**钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁**钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁**物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁**物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。Perlsstain常用于显示局部组织内各种出血***变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。如果选择一家靠谱的病理实验外包检测公司。推荐的病理实验外包公司
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病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸软骨素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致,当软骨受到损伤时,创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤维牢固结合,不宜褪色。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→固绿染色→番红O染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→番红O-固绿染**(成骨呈绿色,软骨呈红色)。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。上海靠谱的病理实验外包