Genovis提供FabRICATOR(IdeS)验证包。三种不同批次的冻干酶,用于验证基于FabRICATOR的分析方法。FabRICATOR(IdeS)是一种IgG特异性半胱氨酸蛋白酶,可消化铰链下方单个氨基酸位点的抗体,产生均质的F(ab')2和Fc片段。FabRICATOR酶已成为生物制药行业中使用的工具,用于表征用于zhiliao用途的单克隆抗体、Fc融合蛋白、ADC和生物仿制药。每批FabRICATOR酶在释放前都经过严格的酶活性、特性和纯度测试。FabRICATOR验证试剂盒由三批冻干酶组成,使方法验证更容易。每批都附有一份分析证书。QC应用的简化方法验证;批次间变异性评估的理想形式;提高批量放行检测性能的可信度。为了分别研究度拉糖肽的肽和 Fc 区域,从而鉴定结构域特异性 PTM。江苏FabRICATORIdeS蛋白酶
Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人类亚类以及人源化和嵌合 IgG。该酶对其他物种的 IgG 也有活性,包括来自大鼠、猴子、兔子和绵羊的某些类别的 IgG。因此,FabRICATOR的高特异性在某些情况下会使其对铰链区域的突变敏感,并损害酶活性。来自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,与 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化这些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在铰链下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。对于这种抗体种类,FabULOUS 和 FabULOUS Fab 试剂盒可用于制备 Fab 片段。山西GlycINATORIdeS蛋白酶蛋白组学Genovis的IdeS蛋白酶是IgG特异性半胱氨酸蛋白酶。
为了让所有实验室都能同时快速自动消化多种抗体,Genovis的FabRICATORMagIC的设计具有灵活性,适用于一系列自动化平台。我们在ThermoScientific™KingFisher™纯化系统上优化了FabRICATORMagIC的工作流程,但它可以转移到其他自动化平台,如果没有自动化,在振动台上也能同样出色地工作。消解后,将含有处理样品的深孔板直接转移到LC-MS的自动进样器中进行快速色谱分析,或转移到其他分析方法进行分析。FabRICATORMagIC与在消解缓冲液中添加0.05%聚山梨醇酯20兼容,以极大限度地减少自动化系统中可能发生的纯粹压力。使用KingFisher仪器处理样品时,样品制备非常简单。将样品、树脂和缓冲液移液到指定的孔或板中,然后将板放入仪器中。设计用于FabRICATORMagIC的BindIt™协议将控制每个步骤的孵育温度和时间。
IgA 消化酶的 IgASAP 家族特异性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段。IgASAP Sub1 特异性消化人 IgA1,而 IgASAP Sub1+2 同时消化人 IgA1 和 IgA2m1。 Sub1+2 特异性消化铰链上方的 IgA1 和 IgA2m1。两种酶都产生完整且均质的 Fab 和 Fc 片段。为了获得纯和完整的Fab片段,使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit进行人IgG1的消化和抗体片段的后续纯化。通过与 GingisKHAN 孵育,然后在 CaptureSelect™ 人 CH1 离心柱上亲和纯化,在曲妥珠单抗上证明了完整的片段生成。样品的酶和Fc部分存在于色谱柱的流通中,Fab很容易通过降低pH洗脱。使用该试剂盒,可以制备 0.5 mg 至 2 mg 人 IgG1 的 Fab 片段。Genovis同时提供IdeS酶的纯化试剂盒。可在铰链上方的一个特定位点消化人 IgA1,产生完整且均质的 Fab 和 Fc 片段。
大多数zhiliao性抗体都携带人IgG1骨架,双特异性和多特异性形式的开发正在迅速增加。此类抗体的分析需要特异性酶来表征特性,例如单价结合、二硫键扰乱和配对Fc糖基化。传统方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化,这需要优化以极大限度地减少过度消化并获得足够的产量。Genovis的FabDELLO与IdeS酶具有不同的特异性,它在铰链上方的单个位点消化人IgG1,并产生完整的Fab和Fc片段。为了证明FabDELLO的特异性活性,通过非还原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的选择。所有底物均实现了完全消化,包括具有其他困难的LALA和LFLE突变的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精确和有效性能验证了其在生物制药开发中的用途。Genovis的GlySERIAS可以对融合蛋白、多特异性抗体。四川GlycINATORIdeS蛋白酶
FabRICATOR(IdeS蛋白酶)的一大优势是速度!江苏FabRICATORIdeS蛋白酶
Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)与IdeS酶一样是特异性蛋白酶。在二维核磁共振波谱 (2D-NMR) 之后,可以通过 HOS 分析在精确的原子水平上评估 mAb 的关键质量属性。从Genovis的FabALACTICA Immobilized获得均相Fab和Fc片段的工作流程,是评估嵌合单克隆抗体英夫利昔单抗中HOS的理想选择,在海报“FabALACTICA产生纯和均相的mAb亚基,促进2D-NMR波谱分析”中进行了描述。来自生成的 Fab 和 Fc 片段的高质量信号和光谱分辨率导致能够观察 Fab 和 Fc 之间的结构变化、氧化和非氧化样品之间的差异,并通过观察原子分辨率来比较原研剂和生物仿制药的 HOS。江苏FabRICATORIdeS蛋白酶
当你应用像肽图这样的方法时,你可以从Genovis中级方法中获得的信息量就没有那么多了。一个主要的区...
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