HCD利用人胎儿胰腺组织中的靶向Zhong Liu发生开发了永生化人β细胞系,其中使用慢病毒载体整合了两个转基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)两种转基因均在β细胞特异性大鼠胰岛素启动子(RIP)的控制下表达。***代细胞,名为EndoC-βH1,以组成型方式表达SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,这些转基因可在loxP介导的CRE重组后被切除,位点位于慢病毒骨架的3'LTR。EndoC-βH5细胞是通过使用表达可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒载体对人胎儿胰腺进行靶向Zhong Liu发生而获得的。生长因子促进成人B细胞的扩增诱导其体外去分化。Human cell design(HCD)糖尿病细胞模型传代
EndoC-βH1使用慢病毒介导的基因转移从人类胎儿胰腺中产生功能性β细胞,这些胰腺处于发育的早期阶段,即9至11周,这段时间与β细胞分化的开始相吻合(33)。整合的转基因SV40LT受大鼠胰岛素启动子控制,在胰岛素阳性细胞中特异性表达。通过使用这种靶向方法,SV40LT在新形成的β细胞中表达,同时这些细胞头次产生胰岛素。因此,我们成功地模仿了用于产生功能性啮齿动物β细胞系的转基因方法(7,8,34),用于从人胎儿胰腺中开发功能性人β细胞系。安徽药物开发使用糖尿病细胞模型EndoC-BH1细胞每百万细胞含有0.48 μg胰岛素。
EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等细胞可在体外在葡萄糖剂量刺激下产生正常的胰岛素分泌反应,对GLP-1R/GLP-1等胰岛素刺激因子产生正常响应,可以响应细胞因子刺激,表达HLA-A2等T细胞受体,因此可用于糖尿病炎症相关等多种药物开发实验。EndoC-BH5细胞可批量稳定生产,因此可以进行基于siRNA的高通量筛选研究中,用于鉴定出潜在的2型糖尿病药物靶点。另外,Humancelldesign根据法国生物伦理立法收集人类胎儿组织,获得法国生物医学局(巴黎)的批准,批准号为PFS08-005。
人原代β细胞的可用性有限,从人胰岛制剂中纯化β细胞具有挑战性。在啮齿类动物中,β细胞系自 20 世纪 70 年代初以来就已经可用,并且在研究β细胞功能方面非常有用。然而,啮齿动物的β细胞并不是研究人类β细胞的理想选择,因为人类和啮齿动物的β细胞在许多方面彼此不同。例如,在啮齿类动物中,胰岛素由 2 个基因编码,而在人类中,只有 1 个基因编码。啮齿动物和人类β细胞的功能差异是由于葡萄糖转运和磷酸化在葡萄糖感知中的相对作用不同。糖尿病细胞模型可用于胰岛B细胞的靶标识别和炎症研究。
HCD是通过将人类胎儿胰腺芽移植到SCID小鼠的肾被膜下进行β细胞系的构建的。通过多轮次优化改良,获得的功能胰腺β细胞,无限接近天然人源胰岛β细胞,其胰岛素分泌功能与天然细胞类似,基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应,对GLP-1R激动剂、Exendin-4刺激产生明显增强,且可实现批量化生成,实现稳定供应。Human cell design成立于 2001年,专注于人源细胞模型开发,以助力科研和生物医药企业的发展。其中可作为糖尿病细胞模型的EndoC-BH5,EndoC-BH3,EndoC-BH1等人源胰岛B细胞为其优势产品。糖尿病细胞模型EndoC-BH5 细胞在迄今为止测试的所有功能测定中均表现良好。河南糖尿病细胞模型接近天然胰岛素分泌
糖尿病细胞模型EndoC-BH1细胞检测到B细胞转录因子PDX1, MAFA, NKX6-1和NEUROD1表达与人胰岛细胞制备相似。Human cell design(HCD)糖尿病细胞模型传代
Human Cell Design 通过多年的研究和实验,成功开发出了一系列高质量的人源胰岛β细胞模型。这些细胞模型不仅在结构上与天然胰岛细胞高度相似,还能够在功能上模拟胰岛细胞的生理行为,为糖尿病研究提供了可靠的实验平台。HCD 的细胞模型已经在全球多个实验室中被广泛应用,为糖尿病基础研究和新药开发提供了重要支持。HCD 的 EndoC-BH5 细胞系在糖尿病研究中具有广泛应用,其在高葡萄糖环境下能够表现出胰岛素分泌反应,为研究胰岛素调节机制和开发新型抗糖尿病药物提供了重要支持。这些细胞模型的高稳定性和可重复性,使得研究结果更加可靠,为科学家们提供了宝贵的研究平台。Human cell design(HCD)糖尿病细胞模型传代
Humancelldesign(HCD)开发了一种用于在人类胎儿组织中使用靶向Zhong Liu产生...
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