上海电镜外泌体售后服务

    外泌体（Exosome）是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的直径30-150nm的纳米级脂质包裹体结构，密度，内部包裹了蛋白质、mRNA和microRNA等物质。包括**细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，***又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳等，而不同组织来源的外泌体在内容物组成和功能方面存在差异，同时这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。越来越多的证据表明，宿主细胞或**细胞分泌的外泌体参与了**发生、生长、侵袭和转移。对外泌体的分析和检测可以辅助疾病的早期诊断、疗效评价和预后分析。 对于不同的需求我们选择不同的外泌体系列。上海电镜外泌体售后服务

   作者就在miR-19a安装了一个“监视器”，然后转染到星形胶质细胞内，再与**细胞，CAF共培养，在光镜和荧光图像下追踪到，miR-19a转移到了**细胞内，且在******显微镜下观察到了星形胶质细胞培养基有较多的外泌体（相较于CAF)。并一再证明是外泌体将miR-19a运载到**细胞：体外干扰外泌体；体内干扰外泌体；干扰外泌体后再加入外泌体。得出第三个结论：星形胶质细胞分泌的外泌体，将靶向PTEN的miR-19a转运到**细胞。 四川鉴定外泌体报价云生物主营产品很多，包括外泌体抽提和测序。

    外泌体CD63&Tsg101检测试剂盒：外泌体CD63&TSG101蛋白检测试剂盒是针对外泌体标志蛋白CD63和TSG101检测而研发的一款高效且方便的试剂盒产品。该产品中包含外泌体蛋白**裂解液：其组分经过优化处理，可高效裂解外泌体；CD63&TSG101蛋白阳性对照品：由Hela细胞裂解后制备而成，可用于监测实验体系；CD63和TSG101抗体：该抗体经过严格筛选而得，适用于外泌体CD63和TSG101蛋白的检测。操作指南1、实验准备：实验前先将裂解液融化混匀后置于冰上（如有沉淀析出，可37℃加热至溶解）；2、将外泌体样本与裂解液按体积比1:1添加混匀，置于冰上裂解10min；3、12000g离心5min，取上清，进行BCA蛋白浓度测定及WesternBlot等实验；4、进行SDS-PAGE实验时，取CD63&TSG101阳性对照品10μg与实验样品同时进行。

⊙外泌体的膜同细胞一样，是磷脂双分子层

⊙外泌体膜含有MHC-1/2蛋白，能绑定特异性的肽链

⊙外泌体膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2

⊙外泌体膜中有膜转运融合蛋白annexins、RAN、GTPases

⊙外泌体膜上有脂质筏Chol、ceramide、SM、PC，限制膜流动，参与包括跨膜信号转导、物质内吞、脂质及蛋白定向分选的多种功能

⊙外泌体中含有核酸，包括miRNA、DNA、lncRNA、mRNA；同时还有一些蛋白、脂类也能被包裹到外泌体中

⊙与外泌体产生相关的重要分子：Ral、ARF6、PLD2、RAB家族

⊙一些物质进行外泌体中是特异性的：如hnRNPA2B1能结合lncRNA或miRNA特异性的序列（GGAG/CCCU），进行主动包埋 外泌体抽提有哪些方法呢？

细胞上清（需采用去除外泌体的培养基）：

(1) 细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间，贴壁细胞密度在70 %-80 %，悬浮细胞密度在60 %-70 %；

(2) 对于贴壁细胞，去除原有培养基，换为新的不含外泌体的培养基或者无血清培养基；对于悬浮细胞，300 g，4°C，10 min收集细胞；

(3) 使用不含外泌体的培养基或者无血清培养基悬浮细胞并继续培养。细胞继续培养24-48 小时，根据细胞的生长速度确定收取上清时间；

(4) 收集细胞上清，300 g，4°C，离心10 min；小心吸取上清，注意避免吸入细胞或者细胞碎片；

(5)   3000 g，4°C，再次离心15 min，确保将细胞或者细胞碎片去除干净；

(6) 取上清，注意避免吸入细胞或者细胞碎片，合并相同的细胞培养液上清样品，装入无菌的玻璃瓶，可在4°C短期保存（1-2天），长期保存可冻存于-80°C 。建议细胞上清分离后尽快进行外泌体分离，保存在4°C和-80°C，都会对产量有一定的影响。

血浆样品外泌体怎么制备？上海电镜外泌体售后服务

⊙外泌体发挥功能并一定需要受体细胞摄入外泌体：外泌体的膜蛋白有可能与细胞膜蛋白作用，***细胞内通路

⊙外泌体的角色之一：细胞-细胞通讯，比如抗原递呈

⊙外泌体的角色之二：垃圾箱，外排多余或者无功能的细胞成分

为什么要研究外泌体？：

⊙揭示疾病发病机制：从微环境角度揭示细胞之间通讯促进疾病发生的原因。

⊙寻找疾病诊断和预后的分子标志物

⊙外泌体作为药物载体，实现靶向给药

外泌体的分离和鉴定方法：

⊙外泌体的分离：差速离心、密度梯度离心、体积排阻色谱法、过滤法、聚合物沉淀法、免疫分离、隔离筛选法

⊙外泌体分离后需要进行粒径分析：如NanoSight NS300

⊙外泌体检测的marker：常用的有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70

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