有些研究证明外泌体miRNA的表达水平在不同生理条件下是会变化的。在健康人血清外泌体中,miR-21的水平比那些恶性胶质瘤患者更低。在非小细胞肺*患者血浆囊泡中,let-7f,miR-20b和miR-30e-3p的水平比正常对照组更低。在良性**和卵巢*中,发现了八种外泌体miRNA的表达水平不同,包括miR-21和miR141。以上研究都表明外泌体的来源细胞有一种分拣机制来指导特异性的miRNA进入外泌体。根据前人的研究,存在一种类型的miRNA,它们更偏好于被装入外泌体,如miR-320和miR-150。miR-320家族***分布于正常组织和**分泌的外泌体中。miR-150在HEK293T细胞株、**患者的外周血、集落刺激因子-1诱导的骨髓来源的巨噬细胞和结肠*患者血清中的外泌体中都有高表达。而且,一些miRNA,如miR-451,在正常细胞来源的外泌体中高表达,如HMC-1细胞株、HEK293T细胞株和初级T淋巴细胞。还有一些miRNA,如miR-214和miR-155,在**细胞株来源的和**患者外周血的外泌体中含量丰富。 您了解外泌体的优势吗?北京粒径外泌体报价
在一项发表于Nanoscale杂志的研究中,研究者提出了一种基于新型巯基(NovelThiol-Based)的胞外囊泡荧光标记方法,采用共聚焦显微镜等方法观察在*细胞源性外泌体在***细胞中的动态变化。制备荧光标记外泌体的步骤如下:1.取200μg/ml的C5-马来酰亚-Alexa488(绿色荧光)或C5-马来酰亚-Alexa633(红色荧光)µl,加入提取好的含60-100µg蛋白质的30ul外泌体样品中,以PBS补足至50ul,不搅拌的情况下于暗室中室温孵育60分钟。2.在孵育时将exosomespincolumns(Invitrogen)试剂盒按照说明书准备好并将粉末树脂于室温下水合15-30分钟。3.将装有柱子的收集管于离心机水平转子中以750xg离心2分钟,弃收集管,向树脂中加入荧光染料孵育后的外泌体4.将柱子置于xg离心3分钟,多余的染料会被树脂吸附5.荧光标记后的外泌体缓慢加入1000ul不含酚红的DMEM,于μm过滤膜过滤后。分装并储存于负80度备用。以这种方法制备的外泌体在HELA细胞中,随着时间延长,带有绿色荧光(EV488)的外泌体逐渐密集于细胞核周围,可以明显观察到外泌体的动态变化过程。北京分离外泌体价格血浆样品抽提外泌体需要提供多少量?
转移的**细胞为适应新环境,沉默了自己的基因,促进**转移灶形成,而沉默基因的正是外泌体中的microRNA。文章概要为:“Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth”,由外泌体分泌的microRNA引起微环境介导的PTEN丢失,为脑转移生长做了准备。这篇是2015.10.19发表在Nature 上的文章,文章主要讲的是,脑环境依赖的PTEN可回复性表达,受脑内的星形胶质细胞分泌的外泌体中的microRNA调控。
基因表达谱的***重编程是*症发展的标志。因此,系统鉴定驱动病理基因表达模式的调节途径是理解和****症的关键步骤。除了作为转移基础的转录网络之外,转录后调控途径也已成为该过程的主要调节因子。miRNA是参与基因沉默的小RNA(smRNA)的亚类,是***个在功能上与乳腺*进展相关的转录后调节因子。RNA结合蛋白(RBPs)也是基因表达的关键调节因子,并且已经显示几种特异性RBP影响**发生和进展。近日,来自加州大学旧金山分校的研究人员探究了**是否存在RNA或蛋白质水平推动的新型调节方式。该研究团队重点关注了*细胞特异性小非编码RNA作为调节因子的可能来源是否能够调节疾病相关的通路和过程。为了搜索在乳腺*细胞中表达并且在正常乳腺组织中检测不到的smRNA,研究人员实施了一种无偏见的方法,将*细胞系的小RNA测序(smRNA-seq)和患者来源的异种移植物(PDX)模型结合起来,整合现有临床乳腺*数据集进行分析。研究发现并注释了201个先前未知的smRNA,这些smRNA在乳腺*细胞中表达而不在乳腺上皮细胞中表达。将这些RNA称为“孤儿”非编码RNA(oncRNA),以突出其*症特异性生物发生。为了评估该类别的任何成员是否在乳腺*进展中起直接作用。外泌体RNA测序用什么平台?
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外泌体的基本信息:⊙外泌体的大小:外泌体的直径约40-150nm
⊙从研究上来讲并不太严格区分外泌体(exosomes)或微泡(microvesicles)
⊙外泌体属于胞外囊泡类,除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡
⊙外泌体的直接比微泡的要小,后者直径为100nm-1μm
⊙外泌体的数量:人体中大约有1014个,近乎于平均每个细胞产生1000-10000个
⊙外泌体的细胞源:人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体
⊙外泌体具有异质性,即使是同一种细胞分泌的外泌体都有可能具有很大功能区别
⊙外泌体的存在:外泌体几乎存在于所有的组织、细胞间隙、体液中
⊙外泌体产生于细胞中的多泡体 北京粒径外泌体报价