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免疫组化基本参数
  • 品牌
  • 融享
  • 公司名称
  • 上海融享生物科技有限公司
  • 行业类型
  • 生物行业
  • 安全质量检测类型
  • 可靠性检测
  • 服务内容
  • 免疫组化
  • 所在地
  • 上海
  • 检测类型
  • 行业检测
  • 服务分类
  • HE染色
免疫组化企业商机

定位准确、形态与功能相结合

该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。

7、从蛋白水平检测角度,免疫组化技术与Western blotting、ELISA的异同

1)Western blotting

蛋白质免疫印迹,也是利用抗体抗原反应原理,结合化学发光等技术来检查组织或细胞样品内蛋白含量的检测方法。与免疫组化技术相比,定量可能更加准确;当然Western blotting也可定性和定位(通过提取膜蛋白或核酸白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量,进而间接反映它们的定位),但敏感性远远低于免疫组化技术。


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 免疫组织化学(Immunohistochemistry)又称 免疫细胞化学。它是 组织化学的分支,它是用标记的 特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术。 中文名 免疫组化技术 外文名 Immunohistochemistry 又    称 免疫细胞化学 属    于 组织化学 目录 1 前言 ▪ 发展介绍 ▪ 技术分类 ▪ 标记物 ▪ 应用 2 免疫组织化学 免疫组化技术前言 编辑 免疫组化技术发展介绍 ——1941年 Coons 首先用 荧光素 标记抗体—检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶标抗体技术——铁蛋白标记Ab技术。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技术,建立 辣根过氧化物酶——抗体过氧化物酶(***)技术,使免疫细 胞化学得到广泛应用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素(ABC)法之后,免疫金—银染色法、半抗原标记法、 免疫电镜 技术相继问世。 天津组织免疫组化哪家好免疫组化找融享生物专业又高效。

好坏有着密切的联系。由于各种抗原的生化、物理性质不同,如温度高低、酸碱度强弱及各种化学试剂的作用均可影响抗原的免疫学活性,良好的细胞和组织学结构将有助于抗原的准确定位。因此,细胞和组织标本的采集制备在免疫组织化学技术中占有十分重要的位置。(一)细胞标本的取材目前,免疫组化技术已经应用于细胞学诊断,如鉴别低分化*与恶性淋巴瘤、黑色素瘤、低分化肉瘤等。CEA应用于胸腹水中间皮瘤与*的鉴别,热修复法 现常用微波修复、高温高压修复、水浴加热修复法。较常用的修复法是pH6.0枸橼酸缓冲液。修复过程中的注意要点是:(1)达到规定的温度(92℃~95℃以上);(2)维持一定的时间,微波修复、水浴加热须控制在10~15min,高温高压修复须控制在2min左右;(3)避免切片干涸,如果切片干涸,抗原则可能完全丢失;(4)加热后必须经过室温自然冷却20~30min,使未折叠的蛋白分子链恢复天然构型。

免疫组化镜检

在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位:细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达(如:MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上)和表达组织(如:VWF抗体在血管壁上表达,呈现环形)。

在显微镜下观察时,先在4倍镜下查找组织及其范围,然后查看整个组织确定阳性产物的表达部位,然后将阳性产物表达部位置于视野正**,换高倍镜观察。细胞凋亡检测

细胞凋亡原理:正常凋亡细胞通过检测凋亡细胞段进行染色,正常的、人为造成凋亡的细胞很少能够被染色。以甲基绿复染,便于从形态学上分辨评估正常细胞和凋亡细胞。

首先确定目标凋亡细胞的组织部位(如眼球组织,由于玻璃体结构内没有细胞核,因此看不到凋亡,在整个组织的较好外面有单层视网膜细胞,因此只能在较好边缘查看凋亡细胞的阳性产物)


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检测中的显色反应免疫组化显色是一种酶促反应,它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应,生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同,细胞分化不一,抗原含量不等,显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多,每步应按操作要求严格操作,脱蜡时间一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略,因PBS液内含有盐,可以减少背景染色。滴加试剂时要均匀、足够,要比切片上的组织界限宽出0.05~0.35cm防止出现边缘效应。即使是同一种抗体,由于产品批号不同,其效价可能有差异,因此,新购进的抗体一定要进行预实验,找出比较好条件并进行记录。此外,组织浸液的温度,切片烘烤的温度控制,实验操作过程中的室内温度及抗体的效价等都是影响免疫组化标记质量的重要因素。耐心细致的工作态度,标准化、规范化的操作,是完成实验的基本保证。免疫组化服务优 周期短,效率高。辽宁荧光免疫组化检测电话

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