色反应的控制 免疫酶染色应注意控制：①成色质浓度和温育时间可调节 ，增加成色质的量和/或增加底物温育时间，可增加反应产物强度。着色太深可减少温育反应时间。②过氧化物酶显色时，H2O2较大浓度将使显色反应过快而致背景加深；过量H2O2可能88酶的活性。
4．复染 根据所用的染色方法和呈显颜色等，可选用适当的复染方法。如阳性结果呈红或棕色，则用苏木素将细胞核染成兰色，以便定位检测。也可用1%～2%甲基绿复染。
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意义编辑
近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中，5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面：
⑴恶性的诊断与鉴别诊断；
⑵确定转移性恶性的原发部位；
⑶对某类进行进一步的病理分型；
⑷软组织的一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行免疫组化研究对软组织的诊断是不可缺少的；
⑸发现微小转移灶，有助于临床方案的确定，包括手术范围的确定。
⑹为临床提供方案的选择。
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分类
1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。
2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。
3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。
固定若想得到理想的ICC染色结果、正确地判断抗原物质在组织细胞内的位置，除需有良好酶和抗体外，保持组织细胞内抗原物质的不动性（Immobility）和免疫活性也是至关重要的。换言之，如果抗原物质在组织细胞间弥散、丢失或失去免疫活性，无论如何努力染色都是徒劳的，所以说固定是ICC染色中非常重要的一环。ICC与其它组织学技术不同，除要求保存良好的结构外，还需保存组织抗原的免疫活性。一般认为，新鲜组织能够比较大限度地保存组织抗原的免疫活性，但结构较差，易出现抗原弥散丢失现象。Cumming（1980）报告，不固定的组织切片ICC染色时，环鸟苷酸含量丢失80%以上病理实验 免疫荧光,HE染色服务实验找融享生物。
免疫组织化学（Immunohistochemistry）又称 免疫细胞化学。它是 组织化学的分支，它是用标记的 特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分布进行组织和细胞原位检测技术。 中文名 免疫组化技术 外文名 Immunohistochemistry 又 称 免疫细胞化学 属 于 组织化学 目录 1 前言 ▪ 发展介绍 ▪ 技术分类 ▪ 标记物 ▪ 应用 2 免疫组织化学 免疫组化技术前言 编辑 免疫组化技术发展介绍 ——1941年 Coons 首先用 荧光素 标记抗体—检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶标抗体技术——铁蛋白标记Ab技术。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技术，建立 辣根过氧化物酶——抗体过氧化物酶（PAP）技术，使免疫细 胞化学得到广泛应用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—银染色法、半抗原标记法、 免疫电镜 技术相继问世。 融享生物免疫组化病理实验优势 报告精细解读、极速周期、实验辅助设计，模块报价。内蒙古组织免疫组化哪家好
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免疫组化镜检
在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位：细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达（如：MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上）和表达组织（如：VWF抗体在血管壁上表达，呈现环形）。
在显微镜下观察时，先在4倍镜下查找组织及其范围，然后查看整个组织确定阳性产物的表达部位，然后将阳性产物表达部位置于视野正中央，换高倍镜观察。细胞凋亡检测
细胞凋亡原理：正常凋亡细胞通过检测凋亡细胞段进行染色，正常的、人为造成凋亡的细胞很少能够被染色。以甲基绿复染，便于从形态学上分辨评估正常细胞和凋亡细胞。
首先确定目标凋亡细胞的组织部位（如眼球组织，由于玻璃体结构内没有细胞核，因此看不到凋亡，在整个组织的较好外面有单层视网膜细胞，因此只能在较好边缘查看凋亡细胞的阳性产物）
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