拍照
有条件的话比较好立即拍照，若不能及时拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和湿度。使用荧光显微镜注意严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序;应在暗室中进行检查;防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜;检查时间每次以1~2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后，荧光也明显减弱或褪色;激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现象;所以较多不得超过2~3h;荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再启用时，须待灯光充分冷却后才能点燃。天中应避免数次点燃光源。关闭汞灯至少在开启15-30分钟后;标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发;使用的玻片等载体，都必须厚度均匀，无明显的自发荧光，如果使用油镜，还必须保证镜油为无荧光镜油;电源比较好装稳压器，否则电压不稳不只会降低汞灯的寿命，也会影响镜检的效果。
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免疫组织化学（Immunohistochemistry）又称 免疫细胞化学。它是 组织化学的分支，它是用标记的 特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分布进行组织和细胞原位检测技术。 中文名 免疫组化技术 外文名 Immunohistochemistry 又 称 免疫细胞化学 属 于 组织化学 目录 1 前言 ▪ 发展介绍 ▪ 技术分类 ▪ 标记物 ▪ 应用 2 免疫组织化学 免疫组化技术前言 编辑 免疫组化技术发展介绍 ——1941年 Coons 首先用 荧光素 标记抗体—检测肺组织内的肺炎双球菌获得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶标抗体技术——铁蛋白标记Ab技术。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技术，建立 辣根过氧化物酶——抗体过氧化物酶（***）技术，使免疫细 胞化学得到广泛应用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—银染色法、半抗原标记法、 免疫电镜 技术相继问世。 安徽荧光免疫组化技术上海免疫组化切片 不掉片，厚薄均匀找上海融享生物科技有限公司价格更低 服务更好。
免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原特异性结合的特点，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借助显微镜的观察，从而在抗原抗体结合部位确定组织细胞结构的一门组化技术。在病理诊断、基础医学研究工作中免疫组化技术已成为非常重要的手段。免疫组化显色是一种酶促反应，它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应，生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同，细胞分化不一，抗原含量不等，显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多，每步应按操作要求严格操作，脱蜡一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略，因PBS液内含有盐，
标本
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本比较好常用、比较好基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中优先的组织标本制作方法。抗体
免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体，单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
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免疫组化镜检
在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位：细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达（如：MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上）和表达组织（如：VWF抗体在血管壁上表达，呈现环形）。
在显微镜下观察时，先在4倍镜下查找组织及其范围，然后查看整个组织确定阳性产物的表达部位，然后将阳性产物表达部位置于视野正**，换高倍镜观察。细胞凋亡检测
细胞凋亡原理：正常凋亡细胞通过检测凋亡细胞段进行染色，正常的、人为造成凋亡的细胞很少能够被染色。以甲基绿复染，便于从形态学上分辨评估正常细胞和凋亡细胞。
首先确定目标凋亡细胞的组织部位（如眼球组织，由于玻璃体结构内没有细胞核，因此看不到凋亡，在整个组织的较好外面有单层视网膜细胞，因此只能在较好边缘查看凋亡细胞的阳性产物）
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是否有效的祛除了内源性酶和生物素 应注意的是，并不是每一种组织均需要祛除内源性酶和生物素，但对于内源性酶和生物素含量丰富的组织如肝脏、肾脏等，如染色效果不佳，均考虑此原因。处理方法为:（1）灭活碱性磷酸酶:常用的方法是将左旋咪唑（24mg/ml）加入底物液中，并保持pH值在7.6～8.2之间，即能祛除大部分内源性碱性磷酸酶，对于仍能干扰染色的酸性磷酸酶，可用50mmol/L的酒石酸;（2）饱和处理内源性生物素:消除内源性生物素的方法是事先滴加亲和素以饱和内源性生物素，使之不再有剩余的结合位点，具体操天津组织免疫组化检测电话
