意义编辑
近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中，5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面：
⑴恶性的诊断与鉴别诊断；
⑵确定转移性恶性的原发部位；
⑶对某类进行进一步的病理分型；
⑷软组织的一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行免疫组化研究对软组织的诊断是不可缺少的；
⑸发现微小转移灶，有助于临床方案的确定，包括手术范围的确定。
⑹为临床提供方案的选择。
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酶消化法 常用的消化酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶，应严格掌握好消化时间、温度和浓度。胰蛋白酶使用浓度为0.05%～0.1%，消化温度为37℃，消化时间为10～40**要用于细胞内抗原的显示:胃蛋白酶使用浓度为0.4%，消化温度为37℃，消化时间为30～180要用于细胞间质抗原的显示，如:Laminin（层粘蛋白），Collagen IV（IV型胶原蛋白）等。热修复法 现常用微波修复、高温高压修复、水浴加热修复法。较常用的修复法是pH6.0枸橼酸缓冲液。修复过程中的注意要点是:（1）达到规定的温度（92℃～95℃以上）;（2）维持一定的时间，微波修复、水浴加热须控制在10～15min，高温高压修复须控制在2min左右;（3）避免切片干涸，如果切片干涸，抗原则可能完全丢失;（4）加热后必须经过室温自然冷却20～30min，使未折叠的蛋白分子链恢复天然构型。吉林IHC免疫组化染色如果您想找一家专业免疫组化服务就找上海融享生物。
5．滴加抗体，4℃过液或室温5′~1hour。6．，洗三次，每次5分钟。7．滴加第二抗体，室温15′~60′。8．洗净，洗三次，每次5分钟。9．滴加ABC复合物，室温15~60分钟。10．洗三次，每次5分钟。11．Tris–HCL5~10分钟，此步可省略。12．DAB—H2O2显色：用，室温5~30分钟，随时镜检（DAB用时新配）13．自来水洗净。14．用Mayer苏木素或甲基绿，复染胞核（可不染）。15．常规脱水、透明、封固、镜检。结果：棕褐色反应产物**抗原X的定位。免疫组化染色基本技术及注意事项1．实验计划①根据课题的内容选用动物，选用配套的Ab。如Ab—I鼠抗人的抗体，与其他种属间无交叉，则不能用其他动物，而且Ab-Ⅱ必须是羊抗鼠，若***法Ab-Ⅲ必须来源于鼠，否则不能连接成复合物。②若要比较染色深浅在对照组与实验组间的差异，在贴片方面较好贴于同一张载片上，否则无可比性。③选用的试剂可靠，货源充足，随时可取。2．Ab稀释度（如系购买的药盒有工作液和原液）（1）工作液：无须稀释（2）原液：①应参照其提供的工作液浓度进行预试验验。如：工作液浓度为1∶1000，可选1∶500，1∶1000，1∶1500试验；若:1∶500有背景，1∶1000阳性反应稍浅，可选1∶750进行试验。②原液的保存。
染色免疫组化可以辅助病理诊断、指导、评估预后，所以在做免疫组化过程中的质控问题处理尤其重要［1］。随着免疫组化试剂新种类不断出现及方法的改进，特别是即用型试剂盒的出现，使抗体的标记更加简便、快捷，更加规范化。免疫组化标准化染色技术是一项实验性很强的技术，任何一个环节出现问题，都可以直接影响免疫组化结果，
【摘要】目的研究CEA免疫组化染色在检测系膜微转移及环周切缘(CRM)侵犯方面的价值。方法选取经纤维结肠镜及病理证实为直肠*病人40例，应用大组织切片技术对术后标本处理，分别行常规染色及CEA免疫组化染色，比较分析两种染色方法在检测系膜微转移及CRM侵犯方面的价值。结果CEA染色检测**浸润程度大于常规病理染色，差异有性（t=5.2**<0.001）
上海融享生物科技有限公司整体实验外包免疫组化等病理实验。
如肽类、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等等均可用免疫组织化学方法显示，因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。较近几年，分子生物学研究异常活跃，但较终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子分子进行定位，进而深入研究其功能。免疫组化技术免疫组织化学编辑染色方法1．直接法荧光素直接标记特异性抗体（—抗）上，标记抗体与抗原结合（在切片上）荧光显微镜下观察→检测抗原。△酶标抗体要显示后镜检。直接法优点：简单，时间短，特异性强。缺点：灵敏度低，所需抗体量大（不经济）。应用：基本不用！2．间接法荧光素标记在二抗上（二抗：抗产生一抗动物的IgG抗体）。※显色后镜检特点：较直接法灵敏，可标记一种抗体→鉴定多种抗原。3．非标记Ab桥法：“桥法”是酶标记抗体的改进，经过三次抗体，其二抗为未标记桥抗体。（1）单桥法(2)双桥法在三抗之后，将二抗和三抗再重复一次，可增大染色强度。★特别提示：注意动物种属关系4．***法（过氧化物酶—抗过氧化物酶法Peroxidaseanti—peroxidasemethod，***法）~是桥法的改良，既先形成***复合物→抗原—抗体—抗IgG抗体—***复合物。该法简化了操作步骤，提高了灵敏度。免疫组化哪里好就找融享生物。浙江免疫学免疫组化实验服务
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实验为例
从我接触的很多本科生和研究生中发现，他们的确是免疫组化“新手”，他们只注重如何做和较好终的结果，但对为什么这样做不太感兴趣。他们常按照网上所说的方法，摸索好的抗体浓度和条件后做出很漂亮的染色结果后，他们就认为自己已经掌握了免疫组化方法了，结果不求上进，更换一种新抗体后或实验出现异常结果后就很难做出来了。当然，免疫组化对于我来说，做过很多，但也不能说什么都会，只不过我做的多了，失败多了和思考多了，可能比新手多了解一些其中的诀窍，拿来与大家进行分享。此外，我个人经验不可能面面俱到，还需要更多有经验的高手一起分享、纠正和补充。在这里。
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