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免疫组化基本参数
  • 品牌
  • 融享
  • 公司名称
  • 上海融享生物科技有限公司
  • 行业类型
  • 生物行业
  • 安全质量检测类型
  • 可靠性检测
  • 服务内容
  • 免疫组化
  • 所在地
  • 上海
  • 检测类型
  • 行业检测
  • 服务分类
  • HE染色
免疫组化企业商机

定位准确、形态与功能相结合

该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。

7、从蛋白水平检测角度,免疫组化技术与Western blotting、ELISA的异同

1)Western blotting

蛋白质免疫印迹,也是利用抗体抗原反应原理,结合化学发光等技术来检查组织或细胞样品内蛋白含量的检测方法。与免疫组化技术相比,定量可能更加准确;当然Western blotting也可定性和定位(通过提取膜蛋白或核酸白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量,进而间接反映它们的定位),但敏感性远远低于免疫组化技术。


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免疫荧光方法

是较好早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用较广。2)免疫酶标方法

免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是较好常用的技术。该方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。免疫酶标方法的发展非常迅速,已经衍生出了多种标记方法,且随着方法的不断改进和创新,其特异性和灵敏度都在不断提高,使用也越来越方便。在病理诊断中广为使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法检测系统等。


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基本原理编辑

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以期达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。分类编辑

免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。


意义编辑

近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中,5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:

⑴恶性的诊断与鉴别诊断;

⑵确定转移性恶性的原发部位;

⑶对某类进行进一步的病理分型;

⑷软组织的一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织的诊断是不可缺少的;

⑸发现微小转移灶,有助于临床方案的确定,包括手术范围的确定。

⑹为临床提供方案的选择。



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    非特异性染色弥散性均匀)2.组织切片制作过程的影响①固定不良—非特异性染色,显示不均。②边缘干燥—非特异性染色(常见),加抗体时勿干片。3.人工假象与特异性结果显示不在同一平面上。阳性对照:用已知抗原阳性的切片与待检标本同时进行免疫细胞化学染色。对照切片呈阳性结果,标为阳性对照。阴性对照:用确证不含已知抗原的标本作对照,应呈阴性结果,称阴性对照。其实这只是阴性对照中的一种,阴性对照还应包括空白、替代、吸收和***实验。▲染色失败的几种原因:(1)所染的全部切片均为阴性结果,包括阳性对照在内。全部(-)原因可能:①染色未完全严格按照操作步骤进行;②漏加一种抗体,或抗体失效;③缓冲液内含叠氮化钠,***了酶的活性;④底物中所加H2O2量少或失效;⑤复染或脱水剂使用不当(2)所有切片均呈阳性反应,原因可能是:①切片在染色过程中抗体过浓,或干燥了。②缓冲液配置中未加氯化钠和PH值不准确,洗涤不彻底。③使用已变色的呈色底物溶液,或呈色反应时间过长。④抗体温育的时间过长。⑤H2O2浓度过高,呈色速度过快。粘附剂太厚。(3)所有切片背景过深,原因可能是:①未加酶消化处理切片。②切片或涂片过厚。③漂洗不够。免疫组化怎么做就找融享生物。动物实验免疫组化公司电话

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被检测的物质

组织或细胞中凡是能作为抗原或半抗原,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。

6、特点

1)特异性强

免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。

2)敏感性高

在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。


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