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免疫组化基本参数
  • 品牌
  • 融享
  • 公司名称
  • 上海融享生物科技有限公司
  • 行业类型
  • 生物行业
  • 安全质量检测类型
  • 可靠性检测
  • 服务内容
  • 免疫组化
  • 所在地
  • 上海
  • 检测类型
  • 行业检测
  • 服务分类
  • HE染色
免疫组化企业商机

免疫组织化学(Immunohisochemistry)检测技术曾被公认为病理学发展史上的第二个里程碑,此项技术发展到现在,较好充实了病理学的内容,使病理诊断结果更精确,将病理学提高到了形态和功能相结合的水平。免疫组织化学方法的敏感性和特异性直接影响诊断结果的准确性。近两年来,在本科同志的配合下,笔者已做免疫组化420例,取得了很好的效果,并且明显的提高了诊断结果的准确性,支持了对临床病人的诊疗。现提出以下五点供同道借鉴免疫组化病理实验融享生物的优势:高效率,性价比高,为病理实验提供有效保障。天津IHC免疫组化

检测中的显色反应免疫组化显色是一种酶促反应,它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应,生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同,细胞分化不一,抗原含量不等,显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多,每步应按操作要求严格操作,脱蜡时间一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略,因PBS液内含有盐,可以减少背景染色。滴加试剂时要均匀、足够,要比切片上的组织界限宽出0.05~0.35cm防止出现边缘效应。即使是同一种抗体,由于产品批号不同,其效价可能有差异,因此,新购进的抗体一定要进行预实验,找出比较好条件并进行记录。此外,组织浸液的温度,切片烘烤的温度控制,实验操作过程中的室内温度及抗体的效价等都是影响免疫组化标记质量的重要因素。耐心细致的工作态度,标准化、规范化的操作,是完成实验的基本保证。辽宁免疫组化公司哪家好上海融享生物免疫组化 收费标准,可以提供有效保障。

基本原理编辑

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以期达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。分类编辑

免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。


    5.滴加抗体,4℃过液或室温5′~1hour。6.,洗三次,每次5分钟。7.滴加第二抗体,室温15′~60′。8.洗净,洗三次,每次5分钟。9.滴加ABC复合物,室温15~60分钟。10.洗三次,每次5分钟。11.Tris–HCL5~10分钟,此步可省略。12.DAB—H2O2显色:用,室温5~30分钟,随时镜检(DAB用时新配)13.自来水洗净。14.用Mayer苏木素或甲基绿,复染胞核(可不染)。15.常规脱水、透明、封固、镜检。结果:棕褐色反应产物**抗原X的定位。免疫组化染色基本技术及注意事项1.实验计划①根据课题的内容选用动物,选用配套的Ab。如Ab—I鼠抗人的抗体,与其他种属间无交叉,则不能用其他动物,而且Ab-Ⅱ必须是羊抗鼠,若***法Ab-Ⅲ必须来源于鼠,否则不能连接成复合物。②若要比较染色深浅在对照组与实验组间的差异,在贴片方面较好贴于同一张载片上,否则无可比性。③选用的试剂可靠,货源充足,随时可取。2.Ab稀释度(如系购买的药盒有工作液和原液)(1)工作液:无须稀释(2)原液:①应参照其提供的工作液浓度进行预试验验。如:工作液浓度为1∶1000,可选1∶500,1∶1000,1∶1500试验;若:1∶500有背景,1∶1000阳性反应稍浅,可选1∶750进行试验。②原液的保存。免疫组化服务优 周期短,效率高。

拍照

有条件的话比较好立即拍照,若不能及时拍照,也要封好片和用指甲油封固,保持避光和湿度。使用荧光显微镜注意严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序;应在暗室中进行检查;防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜;检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱或褪色;激发光长时间的照射,会发生荧光的衰减和淬灭现象;所以较多不得超过2~3h;荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再启用时,须待灯光充分冷却后才能点燃。天中应避免数次点燃光源。关闭汞灯至少在开启15-30分钟后;标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发;使用的玻片等载体,都必须厚度均匀,无明显的自发荧光,如果使用油镜,还必须保证镜油为无荧光镜油;电源比较好装稳压器,否则电压不稳不只会降低汞灯的寿命,也会影响镜检的效果。


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免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借助显微镜的观察,从而在抗原抗体结合部位确定组织细胞结构的一门组化技术。在病理诊断、基础医学研究工作中免疫组化技术已成为非常重要的手段。免疫组化显色是一种酶促反应,它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应,生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同,细胞分化不一,抗原含量不等,显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多,每步应按操作要求严格操作,脱蜡一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略,因PBS液内含有盐,天津IHC免疫组化

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