减少或消除非特异性染色的方法 组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称为非特异性背景染色，较好常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶元和结缔组织成分上。有效方法是在用首先抗体前加制备第二抗体动物之非免疫血清（1：5-1：20）封闭组织上带电荷基团而除去与首先抗体非特异性结合。必要时可加入2%-5%牛血清白蛋白，可进一步减少非特异性染色。作用时间为10-20min。也可用除制备首先抗体以外的其它动物血清（非免疫的）。有明显溶血的血清不能用，以免产生非特异性染色。免疫荧光染色时，可用0.01%伊文氏兰(PBS溶液)稀释荧光抗体,对消除背景的非特异性荧光染色有很好的效果。当然使用特异性高、效价高的首先抗体是较好重要的条件。洗涤用的缓冲液中加入0.85%~1%NaCl成为高盐溶液,充分洗涤切片,能有效的减少非特异性结合而减少背景染色。病理实验 免疫荧光,HE染色，病理切片，蜡块包埋等服务实验找上海融享生物更专业。天津组织免疫组化检测哪里有
标本
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本比较好常用、比较好基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中优先的组织标本制作方法。抗体
免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体，单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
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它的原理
根据抗原抗体反应和化学显色原理情况，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，较终通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。
免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原特异性结合的特点，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借助显微镜的观察，从而在抗原抗体结合部位确定组织细胞结构的一门组化技术。在病理诊断、基础医学研究工作中免疫组化技术已成为非常重要的手段。免疫组化显色是一种酶促反应，它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应，生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同，细胞分化不一，抗原含量不等，显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多，每步应按操作要求严格操作，脱蜡一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略，因PBS液内含有盐，免疫组化服务性价比高周期短。
众所周知，冰冻切片较突出的优点就是能够较完好地保存抗原的免疫活性 ，即具有抗原敏感性高的优点 。因此对冰冻切片通常不进行抗原修复 ，而在作免疫组化的研究时往往需要对组织进行固定，固定液（如多聚甲醛、福尔马林）使组织中的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键，使得不少抗原决定簇被封闭。同时，由于甲醛的聚合作用，使蛋白分子间相互交联形成大分子网络，也导致了抗原有一定的封闭作用 ，从而降低了抗原敏感性。考虑到以上原因，我们对冰冻切片进行高温高压抗原修复并作对比研究。免疫组化服务优 周期短，效率高。黑龙江组织免疫组化公司哪家好
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酶消化法 常用的消化酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶，应严格掌握好消化时间、温度和浓度。胰蛋白酶使用浓度为0.05%～0.1%，消化温度为37℃，消化时间为10～40**要用于细胞内抗原的显示:胃蛋白酶使用浓度为0.4%，消化温度为37℃，消化时间为30～180要用于细胞间质抗原的显示，如:Laminin（层粘蛋白），Collagen IV（IV型胶原蛋白）等。热修复法 现常用微波修复、高温高压修复、水浴加热修复法。较常用的修复法是pH6.0枸橼酸缓冲液。修复过程中的注意要点是:（1）达到规定的温度（92℃～95℃以上）;（2）维持一定的时间，微波修复、水浴加热须控制在10～15min，高温高压修复须控制在2min左右;（3）避免切片干涸，如果切片干涸，抗原则可能完全丢失;（4）加热后必须经过室温自然冷却20～30min，使未折叠的蛋白分子链恢复天然构型。天津组织免疫组化检测哪里有
