继首代小型化双光子显微镜在国际上获得小鼠自由行为过程中大脑神经元和突触的动态图像后,我们成功研制了第二代小型化双光子显微镜。它具有更大的成像视野和三维成像能力,可以清晰稳定地对自由活动小鼠三维脑区的数千个神经元进行成像,实现对同一批神经元的一个月追踪记录。通过对微光学系统的重新设计系统的。微物镜工作距离延长至1mm,实现无创成像。内嵌可拆卸的快速轴向扫描模块,可采集深度180微米的3D体成像和多平面快速切换的实时成像。该扫描模块由一个快速的电动变焦透镜和一对中继透镜组成,在不同深度成像时可保持放大倍率恒定。其变焦模块重量,研究人员可根据实验需求自由拆卸。此外,新版微型化成像探头可整体即时拔插,极大地简化了实验操作,避免了长周期实验时对动物的干扰。在重复装卸探头同一批神经元时,视场旋转角小于,边界偏差小于35微米。多光子显微镜是一种强大的显微镜技术,具有广泛的应用前景和发展潜力。进口多光子显微镜成像区域
比较两表格中的相关参数可以看出,基于分子光学标记的成像技术已经在生物活检和基因表达规律方面展示了较大的优势。例如,正电子发射断层成像(PET)可实现对分子代谢的成像,空间分辨率∶1-2mm,时间分辨率;分钟量级。与PET比较,光学成像的应用场合更广(可测量更多的参数,请参见表1-1),且具有更高的时间分辨率(秒级),空间分辨率可达到微米。因此,二者相比,虽然光学成像在测量深度方面不及PET,但在测量参数种类与时空分辨率方面有一定优势。对于小动物(如小白鼠)研究来说,光学成像技术可以实现小动物整体成像和在体基因表达成像。例如,初步研究表明,荧光介导层析成像可达到近10cm的测量深度;基于多光子激发的显微成像技术可望实现小鼠体内基因表达的实时在体成像。布鲁克多光子显微镜代理光子显微镜是一种使用可见光或近红外光的显微镜。
双光子荧光显微成像主要有以下优点:a.光损伤小:双光子荧光显微以可见光或近红外光为激发光,对细胞和组织的光损伤小,适合长期研究;b.穿透力强:与紫外光、可见光或近红外光相比,穿透力强,可用于生物样品的深入研究;c.高分辨率:由于双光子吸收截面很小P,荧光只能在焦平面很小的区域激发,双光子吸收被限制在焦点λ左右的体积内;d.漂白区域很小,焦点外不发生漂白。E.高荧光收集率与共焦成像相比,双光子成像不需要滤光片,提高了荧光收集率。采集效率的提高直接导致图像对比度的提高。F.对探测光路要求低。由于激发光和发射荧光的波长差越来越大,加上自发三维滤波效应,多光子显微镜对光路采集系统的要求远低于单光子共焦显微镜,光学系统也相对简单。G.适用于多标签复合测量许多染料荧光探针的多光子激发光谱比单光子激发光谱更宽,从而可以用单一波长的激发光同时激发多种染料,获得同一生命现象的不同信息,便于相互比较和补充。
多光子激光扫描显微镜行业发展,世界多光子激光扫描显微镜产业主要布局在德国和日本,德国是以徕卡显微系统和蔡司为,而日本以尼康和奥林巴斯公司为,2020年,上述企业占据着世界多光子激光扫描显微镜市场64.44%的市场份额,其发展战略左右着多光子激光扫描显微镜市场的走向。目前世界市场对多光子激光扫描显微镜的需求在增长,中国市场这方面的需求增长更快,未来五年多光子激光扫描显微镜市场的发展在中国将具有很大的发展潜力。高速扫描和高分辨率的完美结合,多光子显微镜提高样品处理速度和精度。
1,光源、光路高度整合通过精密的设计,将飞秒激光器、扫描振镜、PMT、滤光片组,甚至是单光子荧光光路全套整合在一个不大的扫描头(ScanHead)内,无论扫描头如何移动,扫描头内的光路都可以保持稳定不变,从而实现了超稳定、免维护的特点。2,配合多维度、高精度机械控制系统。扫描头直接架设在一个多维运动的机械装置上,可沿任意方向和角度移动扫描头,方便对动物样本进行多方位的扫描观察。而这在常规方案的多光子显微镜上有很大的实现难度,不但需要多个关节组合的光路导向机构,并且在这些关节旋转的时候,都冒着极大的光路偏移的风险,以至于在使用一段时间后都需要对光路进行再次校准,而这样的问题在我司上则完全不会发生。3.一机多能。高速扫描,高分辨率,多光子显微镜助力科研进步。美国啮齿类多光子显微镜系统
利用多光子显微镜,进行组织内深层结构的无损成像。进口多光子显微镜成像区域
Ca2+是一种重要的第二信使,在调节细胞生理反应中起着重要作用。发展和利用双光子荧光显微成像技术观测Ca2+荧光信号,可以从某些方面分析生物体或细胞的变化机制,具有重要意义。利用双光子荧光显微成像技术,我们可以观察到细胞内荧光探针标记的Ca2*的时间和空间荧光图像的变化,也可以观察到一定水平或部分细胞内(Ca2+)的荧光图像和变化。通过对单个细胞的研究发现,Ca2+的分布不仅在细胞的局部区域之间是不均匀的,而且在细胞内不同深度或层次的局部区域之间也存在不同程度的Ca2+梯度,称为空间Ca2+梯度。进口多光子显微镜成像区域