有许多方法可以实现快速光栅扫描,例如使用振镜进行快速2D扫描,以及将振镜与可调电动透镜相结合进行快速3D扫描。而可调电动式镜头由于机械惯性的限制,无法在轴向快速切换焦点,影响成像速度。现在它可以被空间光调制器(SLM)取代。远程对焦也是实现3D成像的一种手段,如图2所示。LSU模块中,扫描振镜水平扫描,ASU模块包括物镜L1和反射镜M,通过调整M的位置实现轴向扫描该技术不仅可以校正主物镜L2引入的光学像差,还可以进行快速轴向扫描。为了获得更多的神经元成像,可以通过调整显微镜的物镜设计来放大FOV。然而,大NA和大FOV的物镜通常很重,不能快速移动以进行快速轴向扫描,因此大FOV系统依赖于远程聚焦、SLM和可调电动透镜。滔博生物多光子显微镜具有出色的成像深度和分辨率!bruker多光子显微镜Ultima Investigator
多光子显微镜因拥有较深的成像深度,和较高的对比度在生物成像中有着重要的意义,但是它通常需要较高的功率。结合时间上展开的超短脉冲可以实现超快的扫描速度和较深的成像深度,但是其本身所利用的近红外波段的光会导致分辨率较低。清华大学陈宏伟教授和北京大学席鹏研究员合作研究,结合了结构光成像和上转化粒子,开发了一种基于多光子上转化材料和时间编码结构光显微镜的高速超分辨成像系统(MUTE-SIM)。它可以实现50MHz的超高的扫描速度,并突破了衍射极限,实现了超分辨成像。相较于普通的荧光显微镜,该显微镜提升了,并且只需要较低的激发功率。这种超快、低功率、多光子的超分辨技术,在分辨率高的生物深层组织成像上有着长远的应用前景。在体多光子显微镜峰值功率密度高效激发,长波长照射,多光子显微镜提升样品存活率。
从应用的行业来看,多光子激光扫描显微镜主要集中于机构、学校及医院对生物科学的研究。与此同时,光学玻璃、液晶材料、滤光片、电子元器件等光学材料则组成了上行业。处于中游的多光子激光扫描显微镜行业正是受到上下**业的共同影响,才会呈现出目前的市场态势。2020年,全球多光子激光扫描显微镜市场规模达到了,预计2027年将达到,年复合增长率(CAGR)为(2021-2027)。中国市场规模增长快速,2020年,中国多光子激光扫描显微镜市场收入达到了,预计2027年将达到,年复合增长率(CAGR)为(2021-2027)。本报告研究“十三五”期间全球及中国市场多光子激光扫描显微镜的供给和需求情况,以及“十四五”期间行业发展预测。重点分析全球多光子激光扫描显微镜的产能、产量、销量、收入和增长潜力,历史数据2016-2020年,预测数据2021-2027年。本文同时着重分析多光子激光扫描显微镜行业竞争格局,包括全球市场主要厂商竞争格局和中国本土市场主要厂商竞争格局,重点分析全球主要厂商多光子激光扫描显微镜产值、价格和市场份额,全球多光子激光扫描显微镜产地分布情况等。
单光子激发荧光的过程,就是荧光分子吸收一个光子,从基态跃迁到激发态,跃迁以后,能量较大的激发态分子,通过内转换把部分能量转移给周围的分子,自己回到比较低电子激发态的比较低振动能级。处于比较低电子激发态的比较低振动能级的分子的平均寿命大约在10s左右。这时它不是通过内转换的方式来消耗能量,回到基态,而是通过发射出相应的光量子来释放能量,回到基态的各个不同的振动能级时,就发射荧光。因为在发射荧光以前已经有一部分能量被消耗,所以发射的荧光的能量要比吸收的能量小,也就是荧光的特征波长要比吸收的特征波长来的长。多光子显微镜将生物打印结构准确定位和定向到特定的解剖部位,使其能够在小鼠组织内制造复杂结构。
单束扫描技术可以高速遍历大视场(FOV)的神经组织:使用MPM对神经元进行成像时,通过随机访问扫描—即激光束在整个视场上的任意选定点上进行快速扫描—可以只扫描感兴趣的神经元,这样不仅避免扫描到任何未标记的神经纤维,还可以优化激光束的扫描时间。随机访问扫描(图1)可以通过声光偏转器(AOD)来实现,其原理是将具有一个射频信号的压电传感器粘在合适的晶体上,所产生的声波引起周期性的折射率光栅,激光束通过光栅时发生衍射。通过射频电信号调控声波的强度和频率从而可以改变衍射光的强度和方向,这样使用1个AOD就可以实现一维横向的任意点扫描,利用1对AOD,结合其他轴向扫描技术可实现3D的随机访问扫描。但是该技术对样本的运动很敏感,易出现运动伪影。目前,快速光栅扫描即在FOV中进行逐行扫描,由于利用算法可以轻松解决运动伪影而被普遍的使用。精确测量细胞结构与功能,多光子显微镜技术走在科技前沿。模块化多光子显微镜价格
滔博生物-三维显微镜-适用于各行各业的观察需求!bruker多光子显微镜Ultima Investigator
基于多光子显微镜的神经成像技术原理:多光子显微镜可用于深度成像和三维成像,因此可用于拍摄不透明的厚样品。目前主要使用的多光子显微镜包括双光子显微镜和三光子显微镜。双光子显微镜的结构与共焦类似,区别在于:1)双光子显微镜的激发光波长比共焦长,能量较低,但穿透能力较强;2)双光子显微镜没有小孔,提高了检测效率;3)双光子显微镜成像深度较快提高。那么,为什么双光子能具有共焦显微镜所没有的优势呢?原因是它采用双光子激发方式。使用波长较长的激发光子,光子的能量较低,因此电子需要吸收两个这样的激发光子才能达到激发态,从而释放出一个荧光光子。因此,荧光信号的强度与光强的平方成正比。因为焦点处的光强较大,只能在焦点处激发荧光。波长越长,穿透力越强,因此双光子显微镜的成像深度大于共焦显微镜。由于两个光子只在焦点激发荧光,不需要小孔,而是将所有的荧光都收集起来,提高了检测效率。三光子显微镜的原理类似于双光子显微镜,利用三个激发光子可以实现更深的成像深度。由于使用了更长的激发波长,穿透能力更强,成像深度更大。此外,由于较强的非线性效应,荧光信号的强度与光强的立方成正比,因此比双光子具有更低的非聚焦激发和背景噪声。bruker多光子显微镜Ultima Investigator