精子分析仪使用注意事项
1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池,能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀,用微量取液器取5~7ul**加入样品池中,用0.5mm厚皿盖片盖紧。
2.不洁净的计数池可影响精子的活力,尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。
3.精子样品密度过大时,造成图像处理上的粘连,无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时,需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察,以提高样品检出率。 CASA系统可以给出多种精子运动状态的参数,这些参数能够帮助更有效地了解精子的运动特性。美国水生动物精子分析高准确率
二、生化及免疫学检验:1、精浆果糖测定【正常参考值】9.11-17.67mmol/L。【临床意义】(1)精液果糖为0,可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如、两侧输精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常见于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可导致精子运动能量缺乏,甚至不易受孕。2、精浆酸性磷酸酶测定【正常参考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【临床意义】(1)精浆酸性磷酸酶含量增高,常见于前列腺肥大或早期前列腺恶性**患者。(2)精浆酸性磷酸酶含量降低,常见于前列腺炎患者。(3)精浆酸性磷酸酶检测是法医鉴定有无精液**敏感的方法。3、精浆顶体酶活性测定【正常参考值】36.72±21.43U/L。【临床意义】精子顶体酶活力与精子密度及精子顶体完整率呈正相关,其活力不足,可导致男性不育。4、精浆乳酸脱氢酶-X同功酶(LDH-X)测定【正常参考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相对活性:≥0.426。【临床意义】LDH-X具有睾丸及精子的组织特异性,是精于运动获能的关键酶,该酶检测可作为诊断男性不育有价值的指标。睾丸萎缩患者LDH-X降低或消失,精子发生缺陷时无LDH-X形成,少精或无精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。上海精子分析W.H.O 6CASA系统用量少,检测速度快,能够显著提高实验室的工作效率。
前沿性检查:目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为,氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素;新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分,强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求,增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此,手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。
精子手工计数原理及操作方法
1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml CASA系统减少了人为因素对检测结果的影响,提高了检测的客观性和可重复性。
[临床意义]1. 若数日未**、且精液量少于1.5ml者为不正常,说明精囊或前列腺有病变;若精液量减至数滴,甚至排不出,称为无精液症,见于生殖系统的特异性***,如结核、淋病和非特异性炎症等。2.若精液量过多(一次超过8ml),则精子被稀释而相应减少,有碍生育。二、颜色检查[正常参考值]灰白或乳白色,久未**者可呈浅黄色。[临床意义]1.黄色或棕色脓样精液:见于精囊炎或前列腺炎等。2.鲜红或暗红色血性精液:见于生殖系统的炎症、结核和**等。三、粘稠度和液化检查[正常参考值]粘稠胶冻状,30分钟内自行液化。[临床意义]1.精液粘稠度低,似米汤样,可因精子量减少所致,见于生殖系统炎症。??2.液化时间过长或不液化,可抑制精子活动而影响生育,常见于前列腺炎症等。四、精子活动率检测[正常参考值]正常精子活力一般在Ⅲ级(活动较好,有中速运动,但波形运动的较多)以上,**后1小时内有Ⅲ级以上活动能力的精于应>0.60。[临床意义]如果0级(死精子,无活动能力,加温后仍不活动)和Ⅰ级(活动不良,精子原地旋转、摆动或抖动,运动迟缓)精子在0.40以上,常为男性不育症的重要原因之一。CASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。广州Hamilton Thorne精子分析ALH
IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。美国水生动物精子分析高准确率
二、生化及免疫学检验:5、精浆肉碱测定【正常参考值】浓度为239.56±l05.59umol/L。【临床意义】精浆肉碱测定精浆中的肉碱主要由附睾分泌,其次是精囊。精浆中肉碱分为游离肉碱和乙酰肉碱二种,附睾中含高浓度的肉碱,主要与精子在附睾成熟时所需的能量来源有关。现认为精浆肉碱含量和果糖含量的变化,常反映附睾、精囊的功能。精浆肉碱及果糖含量正常,表明附睾、精囊功能正常。当肉碱含量高于正常的50%,而果糖含量降低,则提示精囊功能障碍,附睾功能正常;精浆肉碱约为正常含量的50%左右,果糖含量正常,说明附睾功能障碍,精囊功能正常;而肉碱急剧下降,果糖含量亦减少,表示精囊、附睾功能均发生障碍。6、抗精子抗体(AsAb)测定【正常参考值】阴性。【临床意义】AsAb检测对不育原因检查有重要临床意义。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活动,干扰精子的运行,阻碍精子穿透及精卵结合,使受精发生障碍。即使已经受精,也可能影响发育中的胚胎,造成免疫性流产。不育夫妇AsAb阳性者占25%-30%,当精子输出管道受阻、睾丸损伤、炎症、附睾等生殖系***时,系精子外逸而产生的自身抗体。美国水生动物精子分析高准确率
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