荧光定量 PCR 仪是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对 PCR 产物进行标记跟踪，实时监测反应过程的仪器。工作原理：在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程。随着 PCR 扩增的进行，每经过一个循环，荧光信号就会相应增加。通过检测荧光信号的变化，就可以判断 DNA 的扩增情况，进而实现对初始模板的定量分析。常用的荧光化学物质有 TaqMan 荧光探针和 SYBR 荧光染料等。TaqMan 探针法中，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR 扩增时，Taq 酶的 5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号。SYBR Green Ⅰ 法中，SYBR 荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的 SYBR 染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。纯度差，含有蛋白质、多糖、酚类等杂质，会抑制 PCR 反应，降低扩增效率，影响荧光信号强度。南通QPCR荧光定量PCR仪询问报价
荧光信号强度异常信号值不稳定：在相同的实验条件下，对同一标准样品进行多次检测，若荧光信号强度波动较大，如原本稳定的信号值出现明显的忽高忽低，且排除了样品制备、反应体系等其他因素的影响，可能是光路系统出现问题，需要校准。信号值偏低或偏高：与以往正常实验结果相比，荧光信号强度明显偏低或偏高。例如，正常情况下某种样品在特定循环数下的荧光值应该在一定范围内，但现在检测到的数值远低于或远高于该范围，且排除了试剂、仪器参数设置等因素，可能是光路系统的荧光激发或检测效率发生变化，需要对光路系统进行检查和校准。荧光荧光定量PCR仪厂家供应并且，TET 染料具有较高的荧光量子产率，即在受到激发后能够高效地发出荧光。
VIC与 FAM 类似，是一种荧光报告基团，可标记在引物或探针上用于荧光定量 PCR。它在 PCR 过程中，随着引物或探针与目标 DNA 的结合以及 PCR 产物的扩增，会发出特定波长的荧光，其荧光信号强度与 PCR 产物的量成正比，通过检测荧光信号的变化来实现对目标 DNA 的定量分析。特点：激发波长和发射波长与 FAM 有所不同，激发波长约为 538nm，发射波长约为 554nm，荧光颜色为黄绿色。VIC 常用于多重荧光定量 PCR 中，可与 FAM 等其他荧光染料同时使用，实现对多个不同目标基因的同时检测，因为其光谱特性与其他染料有较好的区分度，能避免荧光信号之间的相互干扰。
仪器提示或报错仪器软件可能会提示光路系统出现故障或异常，如 “荧光信号异常”“光路校准错误” 等报错信息。这是仪器自身检测到光路系统存在问题，需要进行校准或维修的直接提示。仪器使用时间和环境因素使用时间：如果仪器已经使用了较长时间，如超过一年且频繁使用，即使没有出现明显的异常现象，也建议按照厂家的建议定期对光路系统进行校准，以确保仪器始终保持良好的性能。环境变化：仪器所处的环境发生较大变化，如温度、湿度剧烈波动，或者仪器经过搬运、移动后，可能会导致光路系统的部件发生微小位移或性能改变，此时也需要对光路系统进行校准，以保证检测结果的准确性。若温度控制不准确，会导致 PCR 反应效率降低、特异性下降，产生非特异性扩增，影响荧光信号准确性；
SYBR Green I是一种双链 DNA 结合染料，它能非特异性地嵌入双链 DNA 的小沟中。在游离状态下，SYBR Green I 发出微弱的荧光，但当它与双链 DNA 结合后，荧光信号会明显增强。在荧光定量 PCR 反应中，随着 PCR 产物的不断合成，SYBR Green I 与双链 DNA 结合，荧光信号强度不断增加，通过检测荧光强度的变化来反映 PCR 产物的量，从而实现对起始模板的定量分析。特点：能与所有双链 DNA 结合，不依赖于特定的序列，因此可用于各种 DNA 模板的定量分析，通用性强。其激发波长约为 497nm，发射波长约为 520nm，荧光颜色为绿色。但由于它非特异性结合双链 DNA，可能会对引物二聚体等非特异性产物也产生荧光信号，需要通过熔解曲线分析等方法来区分特异性产物和非特异性产物。TET荧光定量PCR仪能与多种 PCR 反应体系和缓冲液兼容，不影响 PCR 扩增效率和特异性。扬州HEX荧光定量PCR仪代理商
强度高且稳定的光源能保证 TET 染料被充分激发，而高灵敏度、低噪声的探测器可准确捕捉微弱荧光信号。南通QPCR荧光定量PCR仪询问报价
TAMRA（四甲基罗丹明）常作为荧光共振能量转移（FRET）中的淬灭基团与其他荧光基团搭配使用，如与 FAM 等供体染料配合。当供体染料被激发时，能量会转移到 TAMRA 上并以非荧光形式耗散，从而实现对荧光信号的调控。在荧光定量 PCR 中，常利用这种能量转移机制来检测 PCR 产物的生成。例如，在 TaqMan 探针中，FAM 标记在探针的 5' 端，TAMRA 标记在 3' 端，当探针完整时，FAM 的荧光被 TAMRA 淬灭；而在 PCR 延伸过程中，Taq 酶的 5' - 3' 外切酶活性会将探针水解，使 FAM 与 TAMRA 分离，FAM 荧光恢复，从而实现对 PCR 产物的定量检测。特点：激发波长约为 550nm，发射波长约为 580nm，荧光颜色为红色。TAMRA 具有较好的光稳定性和较高的量子产率，能够产生较强的荧光信号，并且与许多常用的荧光基团具有良好的光谱兼容性，适用于多种荧光检测平台。南通QPCR荧光定量PCR仪询问报价
