紫外可见分光光度计定量、定性分析需注意的问题
重复测定次数和波长扫描速度:对吸光度不是很大的样品,或者狭缝不是很小,这是检测器检测的光信号的强度是比较大的,重复性较好,可选择较少的重复次数。相反,如果样品吸光度很大,狭缝很小,选择较大的重复次数可获得更好的结果。5测定波长间隔:在扫描光谱时需要选择,可根据样品吸收峰的宽度进行选择,峰宽较大时,可选择较大的波长间隔。反之亦反。通常每个正常的吸收峰应该用不少于30个数据点表示出来。 自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决大多数难题的仪器。食品安全紫外可见分光光度计代理
使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面?
使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。
供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度MAX的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。 常用紫外可见分光光度计多少钱在选择紫外可见分光光度计之前, 需要了解仪器的基础构架,有哪些地方是消耗品,有想哪些需要维修保养。
常见的可见分光光度计和紫外可见分光光度计的型号有哪些?
可见分光光度计常见的有721系列,722系列和723系列。721系列可见分光光度计有721/721-100型,测定波长为360-800nm,分为分指针和数显式两种方式的显示器。其中721-100型相对于721是型将测试样品室加宽,可用10cm的比色皿,为糖厂**检测仪器。722系列可见分光光度计有722/722S/722N型,测定波长为330-1000nm/325-1000nm。722型波长是330-1000nm,722S与722N的波长范围325-1000nm,其中722N是自动调节波长。723系列可见分光光度计有723/723N/72**C/72**CS型四种,测定波长为320-1000nm,其中723是手动调整波长,723N是自动调波长,72**C配有扫描软件,72**CS带有扫描软件和打印机。紫外可见分光光度计常见的是UV752/UV752N,波长范围是195nm-1020nm。二者主要区别是UV752N可以选配打印机将数据输出,其中在杂散光参数,光谱带宽等方面还有细微的差别。
紫外-可见吸收光谱为什么有些化合物是有色的,而另一些化合物却没有?共轭与颜色有什么关系?我们必须对光谱中可见光部分和附近的不同波长处的光吸收进行精确测量。商业光谱仪可对光谱中近紫外和可见部分光吸收进行精确测量。可见光区域的光子能量为36-72kcal/mol,近紫外线区域(至200nm)的能量范围扩展至143kcal/mole。波长小于200nm的紫外线辐射难以处理,因此很少用作结构分析的常规工具。当一束光照射物质时,上述能量会激发分子电子至更高能量的轨道。下图显示了有机分子中发生的各种电子激发的示意图,其包含六个跃迁。通常,只有三个低能量跃迁是通过200至800nm光的能量实现的,也就是说,能够吸收200-800nm区域光的分子应具有π电子系统和具有未成对电子对的杂原子。这种吸光基团称为生色团。当样品分子暴露于具有与分子内可能的电子跃迁相匹配能量的光时,电子受光子激发从高的占据分子轨道(HOMO)跃迁到低的未占据分子轨道(LUMO),一些光能将被吸收,所产生的物质称为激发态物质。光谱仪记录吸收波长以及每个波长的吸收程度,所得光谱用吸光度(A)与波长的关系图表示。吸光度通常在0(无吸收)到2(99%吸收)的范围内。紫外可见分光光度计使仪器显示数字化、进样自动化。
紫外可见分光光度计的基本结构紫外可见分光光度计的工作原理是由光源发出连续辐射光,经单色器按波长大小色散为单色光,单色光照射到吸收池,一部分被样品溶液吸收,未被吸收的光经检测器的光电管将光强度变化转变为电信号变化,并经信号显示系统调制放大后,显示或打印出吸光度A(或透射比T),完成测定。钨灯是常用的可见光光源,它可发射的波长为325~2500nm的连续光谱,其中适宜的使用波长范围为320~1000nm,因此,也可用做近红外光源。电能将钨灯加热到白炽时,发出的光强度在各波段的分布随灯丝温度而变化。灯丝的温度取决于电源电压。电源电压的微小波动都会引起钨光强度的很大变化。因此必须使用稳压电源供电,钨灯工作电压为12V,也可以使用12V的直流电源供电。钨灯的寿命一般可达10000小时以上。目前很多光度计采用卤钨灯代替钨灯,如7230G型、752PLUS型分光光度计等。卤钨灯具有较高的发光效率和较长的使用寿命。一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。双光束紫外可见分光光度计单价
因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。食品安全紫外可见分光光度计代理
紫外-可见分光光度计的类型很多,根据仪器结构可分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计三种,其中单光束分光光度计和双光束分光光度计属于单波长分光光度计。1.单光束分光光度计从光源发出的光经单色器分光后得到一束单色光,通过吸收池后,然后照射在检测器上始终为一束光,如下图所示。该类型的分光光度计结构简单、价格便宜,但由于其杂散光、光源波动等影响很大,所以准确度较差。双光束分光光度计从光源发出的复合光经单色器分光后的单色光被反射镜(切光器)分为强度相等的两束光,分别通过参比溶液和样品溶液,如下图所示。由于两束光同时通过参比溶液和样品溶液,因此能够自动消除光源强度变化所引起的误差。双光束分光光度计一般能自动记录吸收光谱曲线,其灵敏度较好,但结构较复杂、价格较贵。食品安全紫外可见分光光度计代理