芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,微量检测,使用微量样本就能测试;芯弃疾-勃望初芯数字ELISA高速检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品是什么?怎么做到单分子技术的低成本实现?参考原理:
分子水平的疾病检测正在推动早期诊断和治病的新兴变革。该领域面临的一个挑战是,用于早期诊断的蛋白质生物标志物可能存在于非常低的丰度中。传统免疫分析技术的检测下限为飞摩尔范围(10−13M)。数字免疫分析技术将检测灵敏度提高了三个数量级,达到了飞摩尔范围(10−16M)。这一能力有可能在诊断和治病领域开辟新的进展,但这些技术已被限制为不适合高效常规使用的手动程序。我们描述了一种新的实验室仪器,该仪器能够完全自动化单分子阵列(Simoa)技术进行数字免疫分析。该仪器具有单分子灵敏度和多重检测,具有快速周转时间和每小时处理66个样本的能力。针对心血管、肿标、传染病、神经学和炎症研究中的16种感兴趣的蛋白质,开发了单分子和多重数字免疫分析方法。与传统方法相比,Simoa免疫分析方法的平均灵敏度提高了lELISAwas>1200倍,变异系数为<10%。数字免疫分析在推进人类诊断方面具有潜力,这在两个临床领域得到了体现:创伤性脑损伤和传染病的早期检测 芯弃疾数字ELISA试剂开放芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,人人都用能得起的单分子检测;
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
光纤束购自SchottNorthAmericaouthbri,非增强型光泽硅片购自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人,第7页盐酸、无水乙醇和分子生物学级别的吐温-20均购自西格玛-奥德里奇(圣路易斯,密苏里州)。2.7-μm-二羧基磁珠购自瓦里安公司(加利福尼亚州莱克福斯特)。单克隆抗人TNF-α捕获抗体、多克隆抗人TNF-α检测试剂和重组人TNF-α均购自R&DSystems(Minneapolis,MN)。单克隆抗PSA捕获抗体、单克隆抗PSA检测试剂和纯化的PSA购自BiosPacific(埃默里维尔,加利福尼亚州);使用标准方法将检测试剂抗体生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)和SuperBlock®T-20封闭缓冲液购自ThermoScientific(Rockford,IL)。纯化DNA购自综合DNA技术公司(Coralville,IA)。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标
芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本实现多重快速检测!
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
阵列芯片原理:从15µLof基质中的500,000个珠子开始。结果表明,阵列图像的定量分析大约一半的孔在珠子沉降几分钟后被占据。对于SimoaHD-1分析仪,沉降时间减少到90秒,分布在三个仪器处理周期之间。随着珠子重新沉降到阵列中,仪器对其他操作(密封和成像)进行索引,这些操作已经加载到阵列上。通常,会检测25,000-50,000个珠子。由于Simoa中的测量单位(AEB)是一个比率,一定珠装载量的差异不影响数据质量或在大多的范围内保持精度,前提是存在足够的珠子数量以保持在泊松噪声水平之上。22数据质量会受到影响,当泊松噪声主导测量误差时。这发生在与背景相关的正井数量降至约50个珠子以下时,此时泊松噪声明显影响测量的变异系数(CV)。
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芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,低可测试到亚皮克级;芯弃疾-勃望初芯数字ELISA高速检测
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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 芯弃疾-勃望初芯数字ELISA高速检测