创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。蛋白质生物标志物在区分健康和疾病状态方面的临床应用,而监测疾病进展则需要测量复杂样品中的低浓度蛋白质。目前的免疫测定方法测量的是蛋白质的浓度高于10−12M,6而大多数在病症7、神经疾病8,9和接触早期阶段10中重要的蛋白质的浓度被认为在10−16到10−12M之间。需要提高灵敏度的例子包括:一个由一百万个细胞组成的1毫米³疾病,每个细胞分泌5000种蛋白质到5升液体中。Simoa®由现任于哈佛大学医学院的DavidWalt教授作为科学创始人于2007年创立。DavidWalt是美国的工程院,艺术院和医学院三院院士。2010年,DavidWalt将Simoa®技术以封面文章的形式发表在《NatureBiotechnology》上,此技术开始为大众所知并引起业界轰动。Simoa技术(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特点是通用阵列化检测,实现超高的灵敏度,较传统ELISA方法能够高出3个数量级,达到飞克级别(fg/ml)甚至更低。已拿阿兹海默症的两个FDAbreakthroughdevice;通常用于各种科研方向:神经因子、蛋白组学、细胞因子等。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本可同时测2-4个指标;!科研数字ELISA

创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
光纤束购自SchottNorthAmericaouthbri,非增强型光泽硅片购自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人,第7页盐酸、无水乙醇和分子生物学级别的吐温-20均购自西格玛-奥德里奇(圣路易斯,密苏里州)。2.7-μm-二羧基磁珠购自瓦里安公司(加利福尼亚州莱克福斯特)。单克隆抗人TNF-α捕获抗体、多克隆抗人TNF-α检测试剂和重组人TNF-α均购自R&DSystems(Minneapolis,MN)。单克隆抗PSA捕获抗体、单克隆抗PSA检测试剂和纯化的PSA购自BiosPacific(埃默里维尔,加利福尼亚州);使用标准方法将检测试剂抗体生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)和SuperBlock®T-20封闭缓冲液购自ThermoScientific(Rockford,IL)。纯化DNA购自综合DNA技术公司(Coralville,IA)。 单分子检测数字ELISA使用灵活芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品,超敏检测,常规试剂可轻松达到0.2pg!

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;具有以下特点:多重、超敏微量、极速灵活、开放;
只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战:医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而,传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足,这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M(~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述,包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱,但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡,例如程序较长或无法提供定量答案。
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微量:芯片上反应,流道区只有几十微米高度,极大降低试剂、样本用量;微量试剂检测:更少只需10ul样本、试剂只为常规的1/10;
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灵活:可手动、可只使用8孔芯片,总成本、更小实验成本均较低,搭配使用常用实验室小型设备即可使用
测试结果:宽波长扫描仪结果-明场+荧光场同时看到磁珠与荧光,可观测每个磁珠上免疫反应的程度
先进新型的单分子检测方法的普及版 4)数字化高敏ELISA芯片,微量样本实现多重快速检测!IVD数字ELISA检测用时
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单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性,我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见,生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到,该实验不应被视为敏感的DNA检测;该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制,如补充图2所示,这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 科研数字ELISA