单分子POCT芯片的基层医疗适配性，单分子 POCT 芯片的 “样本进 - 结果出” 全自动化设计，完美适配基层医疗单位的检测需求。其操作流程无需专业技术人员，*需将样本加入芯片，启动设备即可完成检测，15分钟内通过手机或平板接收结果，解决了基层医院检验资源不足的问题。在偏远地区或突发事件应急救援中，便携式扫描仪与芯片的组合可快速搭建临时检测平台，实现**抗原、心肌损伤标志物等项目的现场检测，为分级诊疗与公共卫生应急提供了高效工具，推动质量检测技术向基层下沉，提升医疗可及性。多指标高通量数字 ELISA 芯片单个样本可测 2-8 个指标，片内反应检测推动设备小型化。微型数字ELISA快速检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内，从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积（~50fL），导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位，在第二步中，将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔（图1C）。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔，孔径为μm，孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下，用橡胶密封圈密封。Rissin等人，第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物（图1D）。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像，可以区分与单一酶分子相关的微球（“开启”孔）和不与酶相关的微球（“关闭”孔）；补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数（图1D）。使用SiMoA，浓度是因此，我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 芯弃疾产品数字ELISA超敏检测数字 ELISA 芯片标准化生产流程严格，成品质检全检，良品率稳定在 98% 以上。
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它是一种DVD大小的圆盘，由24个阵列组成，每个阵列包含240微米大小的微孔，这些微孔呈径向排列，以便使用蓝光制造工艺和仪器内的液体处理并行处理。图2B显示了集成阵列及其相关流体通道的设计。每个阵列由216,000个40飞升大小的微孔组成，以六边形紧密排列模式排列在平面表面的3×4毫米区域内。每个微孔的标称尺寸为4.25µm直径、3.25µm深度和8µ米中心间距。流体通道深0.5毫米，通道和流体入口端口的总体积为74µLto，可容纳珠子和密封油溶液。通道中包含一个收缩部分以减少液体回流。微珠的分级是西莫亚技术的关键要求，微孔的几何形状足以容纳单个微珠（2.7µmdiameter；以下简称珠子）。西莫亚圆盘由环烯烃共聚物（COP）制造，因其具有高通量注塑成型的适应性，且成本低廉。具有良好的化学、生物和光学性能
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动力学上，对于200,000个微球分散在100μL中，珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA（分别为17.3和30kDa）的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明，在2小时的孵育过程中，蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次，必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中，通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球（见下文），这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到，对应于泊松噪声的可接受变异系数（CV）为6-7%。第三，过高的微球浓度可能导致：a）非特异性结合增加，降低信噪比；以及b）分析物与微球的比例过低，导致活性微球的比例过低，从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿；可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时，为了获得可接受的背景信号（1%）和泊松噪声）。 超多重检测芯片节省耗材成本，21 项指标共享一套耗材，适合大规模筛查与研究。
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参考的其他高灵敏检测方法： 自动版数字 ELISA 芯片配套全自动加样仪与扫描仪，单个芯片支持≥8 样本同时反应，总时长 30 分钟。医疗检测数字ELISA使用速度
两种更多测试的模拟分析信号放大技术是免疫PCR和生物条形码分析。免疫PCR通过将检测抗体标记为DNA分子，然后使用PCR进行扩增和定量，从而提高灵敏度。生物条形码分析利用了与DNA“条形码”标记的抗分析物纳米颗粒，这些纳米颗粒在与捕获在金微粒上的分析物结合后，从纳米颗粒上脱杂以进行定量。这两种方法相对于传统免疫分析法的灵敏度提高了10到100倍，但尚未整合到所需的全自动系统中，也未用于多重分析。为了比较大限度地加速药物发现、验证新型生物标志物并将分子水平诊断引入临床主流，需要一种具有高效率、高质量数据和成本效益的稳健、多重超灵敏蛋白质检测技术。芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品，超敏检测，常规试剂可轻松达到0.2pg！微型数字ELISA快速检测
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将200,000个功能化DNA捕获探针与100μL孵育含有目标DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小时后，移除DNA靶标溶液，用0.2×SSC缓冲液洗涤珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新悬浮并与10nM混合生物素标记的信号探针(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’）对目标DNA具有特异性，孵育1小时。然后将珠子在去除信号探针后用含0.1%吐温-20的0.2×SSC缓冲液洗涤三次。随后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液，混匀并混合1小时。然后将珠子分离并在含0.1%吐温-20的5×PBS缓冲液中洗涤六次。重悬于10μLofPBS中并加载到飞升微升孔阵列上。 微型数字ELISA快速检测
