铜绿假单胞菌分解蛋白质能力甚强,而发酵糖类能力较低,分解葡萄糖,伯胶糖,单奶糖,甘露糖产酸不产气,不分解麦芽糖,菊糖和棉籽糖,甘露醇、乳糖及蔗糖,能液化明胶。分解尿素,不形成吲哚,氧化酶试验阳性,可利用枸椽酸盐。不产生H2S,MR试验和VP试验均为阴性。铜绿假单胞菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。一是o抗原含有内毒养素和原内毒养素蛋白质两种成份。原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,免疫原性强的保护性抗原,不只存在于不同血清型铜绿假单胞菌中,而且普遍存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等g-细菌中,是一种良好的交叉保护抗原。二是脂多糖,与特异性有密切关系。铜绿假单胞菌菌体的一端有单鞭毛,无芽胞,无荚膜。嗜酸性氧化亚铁硫杆菌菌株
由于不同培养基的选择性存在差异,检测铜绿假单胞菌时,如有必要,采用不同培养基进行分离培养,可有效防止漏检现象的发生,提高检出率。绿脓菌素试验需加入氯仿将铜绿假单胞菌产生的色素溶出,此时可采用无菌操作将培养基捣碎,并适当延长浸泡时间,这样可使阳性结果更明显。因实验室温度存在差异,室温较低时明胶培养基呈凝胶状,室温较高时呈液体状,这是正常现象,不会影响明胶液化试验的结果。进行明胶液化试验时,在(35土2)摄氏度条件下明胶培养基呈液态,要判定试验结果必须将其置于(4~10)摄氏度冰箱中10分钟~30分钟,如明胶培养基仍为液态则明胶液化试验为阳性;如明胶培养基凝固,则明胶液化试验为阴性。胜利油田热甲烷微球菌枯草芽孢杆菌有着很好的竞争作用,保护作物根部不受病菌侵染和抑制作物体内病原菌扩散。
葡萄球菌呈球形或椭圆形。直径约0.5--1μm。经常以葡萄串状排列,有时可能散在、成双、短链状存在。没有鞭毛、没有芽孢,体外培养一般不形成荚膜,在体内却可形成荚膜。革兰染色呈阳性。衰老、死亡、被吞噬细胞吞噬、青霉素等药物作用下,菌体可革兰染色阴性。葡萄球菌对营养要求不高,普通培养基生长良好。需氧或兼性厌氧。在18--40℃均可生长。耐盐性强。在含有10%氯化钠培养基中能生长,可用高盐培养基分离菌种。普通琼脂平板上形成圆形,表面光滑湿润,不透明菌落。典型菌株产生脂溶性的金黄色的色素而使菌落呈金黄色。在血琼脂平板上,因金黄色葡萄球菌能产生溶素,在菌落周围形成明显的透明溶血环。
铜绿假单胞杆菌离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。关于细胞贴壁少的问题,冻存细胞解冻时1毫升细胞液要加10毫升-15m培养液,而培养基越少细胞越容易贴附。复苏细胞分装的问题,试验中复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。枯草芽孢杆菌是一种多功能的微生物。
铜绿假单胞杆菌的模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55摄氏度左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性、退火、延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩增的目的基因扩增放大几百万倍。另外,铜绿假单胞杆菌的斜面菌种和冻干菌种应在2-8摄氏度保存。铜绿假单胞杆菌应采用冻结保存管宜采用塑料冷冻保存管,使用玻璃安瓿。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有铜绿假单胞菌存在。固执腐霉菌株
大肠杆菌的生产要严格按照生产流程来做,这样子生产出来的大肠杆菌质量才有保障。嗜酸性氧化亚铁硫杆菌菌株
铜绿假单胞菌通过吸附在病原真类菌的菌丝上,并随着菌丝生长而生长,产生溶菌物质消解菌丝体,使菌丝发生断裂、解体、细胞质消解,有的菌丝原生质凝结;或者是次生代谢产物对病原菌孢子的细胞壁产生溶解作用,致使细胞壁产生穿孔、畸形等现象。铜绿假单胞菌不但能直接抑制植物病原菌,而且能通过诱发植物自身的抗病潜能从而增强植物的抗病性。生防铜绿假单胞菌能促进植物根系及植株生长,增强植物的抗病性,从而间接地减少病害发生。铜绿假单胞菌发酵分为:固体发酵、液体发酵、固液混合发酵3种工艺。嗜酸性氧化亚铁硫杆菌菌株
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