肠毒大肠杆菌是大多数疫苗开发工作所关注的大肠杆菌类型。针对肠毒大肠杆菌的不耐热肠毒和主要定居因子的抗体提供了对产生不耐热肠毒、表达同源定居因子的肠毒大肠杆菌的保护。已经开发了由毒抗原和全细胞组成的口服灭活疫苗,即许可的重组霍乱B亚单位(rCTB)-WC霍乱疫苗Dukoral。肠毒大肠杆菌目前没有获得许可的疫苗,尽管有几种疫苗处于不同的开发阶段。在不同的试验中,rCTB-WC霍乱疫苗提供了很高(85–100%)的短期保护。一种口服肠毒大肠杆菌候选疫苗由rCTB和表达主要定居因子的福尔马林灭活大肠杆菌组成,临床试验表明该疫苗对美国旅行者的严重腹泻是安全的、免疫原性的和有效的,但对埃及儿童的肠毒大肠杆菌腹泻无效。一种由过表达定居因子的重组大肠杆菌株和一种更类似不耐热肠毒的混合类毒LCTBA组成的改良肠毒大肠杆菌疫苗正在进行临床试验。金黄色葡萄球主要是用于口罩阻菌性能验证及其他相关检测。栗褐链霉菌菌株
大肠杆菌生物学特征:1、理化特性。大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性。大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为F型[1]。柱孢隔指孢大肠杆菌在动物群体间的传染的季节发病特征不是非常明显。
枯草芽孢杆菌隶属于芽孢杆菌科、芽孢杆菌属,作为芽孢杆菌科的模式菌株,菌体呈杆状,无荚膜,周生鞭毛能运动,是自然界中普遍存在的革兰氏阳性菌。枯草芽孢杆菌是一种能生成抗逆性孢子的好氧性细菌,便于筛选分离,其所需营养成分简单、生长繁殖速度快、适应性及抗逆性极强,利于大量培养。枯草芽孢杆菌的芽孢有较强耐受力,能耐酸碱、耐挤压、耐高温,在环境不佳时可保持休眠状态,等适宜时再发挥其功能。枯草芽孢杆菌具有液化明胶、还原硝酸盐以及水解淀粉的功能,对动植物及人体均有益无害。目前,枯草芽孢杆菌已普遍应用于医药、食品、养殖和种植等多个行业。
枯草芽孢杆菌是动物饲料中常添加的益生菌种,它以芽孢的形式添加于动物饲料中。枯草芽孢杆菌在动物肠道中复苏增殖后就可发挥其益生特性,包括改善动物肠道菌群、增强机体免疫的能力以及提供多种动物所需的酶类等,可以弥补动物体内源酶的不足,促进动物的生长发育,具有明显的益生作用。枯草芽孢杆菌具有单一菌株,对抗生养素无抗性,对水生动物无毒。在水产养殖中,有两种使用枯草芽孢杆菌的方法。用于水净化,用于改善水质,抑制有害藻类的过度繁殖,消除底部淤积,改良底质,用10倍水稀释浸泡1h后全塘均匀泼洒。口服给药,其用作水生动物的饲料添加剂。添加到鱼饲料中的枯草芽孢杆菌可以改善鱼的胃肠功能,提高饲料利用率,改善肉质,促进生长,并具有良好的防病效果。金黄色葡萄球可以供应冻干粉、甘油菌、斜面试管菌种、定量菌液、菌种涂布、菌种金属片。
金黄色葡萄球菌的分类与分型:根据生化反应和表皮葡萄球菌产生色素不同,可分为金黄色葡萄球菌(S、表皮葡萄球菌(S和腐生葡萄球菌(S三种。其中金黄色葡萄球菌多为致病菌,表皮葡萄球菌偶尔致病,腐生葡萄球菌一般不致病。60%~70%的金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解,表皮葡萄球菌不敏感。用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。肠有害元素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起,Ⅱ群菌对维生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。造成医院传染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和81型菌株。引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。铜绿假单胞菌在自然界分布普遍。栗褐链霉菌菌株
大肠杆菌的性价比非常高,受到各大生产商的青睐。栗褐链霉菌菌株
大肠杆菌表达系统的组成:(一)表达载体:一个完整的质粒载体需要有:复制起点、启动子、插入的目的基因、筛选标记以及终止子。(二)外源基因:在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因,包括原核基因和真核基因。原核基因可以在大肠杆菌中直接表达,但是真核基因含有内含子,大肠杆菌不能对mRNA进行剪切,从而真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。目的蛋白在大肠杆菌系统表达中的形式有二种。一种是在细胞内表现为不溶性的包涵体颗粒。另一种是在细胞内表现为可溶性的蛋白质。可溶性的目标蛋白质除可存在于细胞质中外,还可借助于本身的功能序列和大肠杆菌蛋白质加工、运输体系,至终分泌到周质空间,或外泌到培养液中。(三)宿主细胞:大肠杆菌蛋白表达过程中很重要的因素就是宿主细胞的选择。对于宿主细胞的选择主要根据宿主细胞各自的特征及目的蛋白的特性。对于是适合目的基因表达的宿主细胞主要有以下要求:①容易获得较高浓度的细胞。②能利用易得廉价原料。③不致病、不产生内毒。④发热量低、需氧低、适当的发酵温度和细胞形态。⑤容易进行代谢调控。栗褐链霉菌菌株
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