重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达活性,但在pH6.0-8.5和温度4-30℃范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。产品性质来源(Source)大肠杆菌外观(Appearance)无色透明液体比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定义(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。纯化(Purification)Ni柱亲和纯化纯度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)产品组分运输与保存方法冰袋运输。泛素是一种小分子蛋白,存在于真核生物中,它在细胞内起到调节蛋白质降解、信号转导、细胞周期控制。Recombinant Canine ICAM-1/CD54 Protein,His Tag
产品简介抑肽酶(Aprotinin),又称为抑蛋白酶肽,是一种竞争性、可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可与丝氨酸蛋白酶形成稳定复合物并阻断酶的活性位点,这种结合是可逆的,大多数的抑肽酶-蛋白酶复合物在极端的pH<3.0的条件下解除结合。抑肽酶抑制糜蛋白酶、胰蛋白酶、激肽释放酶和血纤维蛋白溶酶,不能抑制Xa因子和凝血酶。从结构上来说,抑肽酶是一种来自牛肺的单体球状蛋白,由58个氨基酸组成并排列在具有三个交联二硫键的单个多肽链中。重组抑肽酶采用大肠杆菌表达,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,氨基酸序列与来源于牛肺的抑肽酶完全一致,具有与动物源性抑肽酶相同的酶学性质,可替代动物源性抑肽酶用于各种生物技术过程中,如:重组蛋白生产中抑制丝氨酸蛋白酶的活性;细胞培养等。另外,也提供来源于牛肺的抑肽酶(动物源性)酶活单位:能抑制1个胰蛋白酶单位的活力称为1个抑肽酶活力单位(EPU)。储存条件冻干粉2~8℃保存,有效期2年。使用方法抑肽酶与蛋白酶是等摩尔有效结合,推荐的结合pH>6.0,在pH<3.0的条件下不结合。可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃储存。Recombinant Mouse BCMA/TNFRSF17 (hFc Tag)通过使用PNGase F去除糖蛋白上的糖链,可以确定蛋白质是否发生糖基化,以及糖基化位点。
大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体
分子特性的重要性:牛凝血酶的高比活度和纯度使其成为科研中理想的工具酶,有助于提高实验的准确性和重复性。在医学研究中的应用:牛凝血酶在血液学研究、药物筛选和疾病模型构建中具有广泛的应用,对于理解血液凝固机制和开发新型抗凝血药物具有重要意义。安全性与稳定性:牛凝血酶的稳定性好,2~8℃条件下可保存3年,室温下可保存1年,且在生产过程中进行了病毒灭活处理,保证了科研使用的安全性。结论牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)因其高效性和专一性,在生物医学研究中具有不可替代的作用。深入研究其分子特性和生物学功能,将有助于推动相关疾病的诊断。未来方向未来的研究可以集中在以下几个方面:牛凝血酶在新型抗凝血药物开发中的应用。牛凝血酶在疾病模型,特别是血栓性疾病研究中的应用。牛凝血酶作为分子生物学工具酶的进一步优化和改进。跨膜蛋白的表达与制备需要采用合适的表达载体、宿主细胞、培养条件和纯化工艺等方法,优化表达和纯化过程。
分子特性:牛凝血酶的分子特性符合高比活度酶的标准,纯度达到SDS-PAGE电泳无杂蛋白条带的要求。稳定性:牛凝血酶在室温下运输稳定,在2~8℃条件下可保存3年而酶活力未有变化。应用效果:在1:2000的质量比下,牛凝血酶能有效切割蛋白,适用于科研和工业生产中的重组融合蛋白特异性断裂。讨论科研应用:牛凝血酶因其高比活度和专一性,在分子生物学、生物化学和生物工程制药研究中作为工具酶具有重要价值。临床:作为止血药物,牛凝血酶在外科手术中的应用超过100年,因其简便和高效而受到青睐6。生产优势:牛凝血酶的生产稳定性好,纯度高,不含有其他蛋白酶活性,适合大规模生产和应用。常用的跨膜蛋白表达系统包括大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统等。Recombinant Mouse CADM3 Protein,His Tag
α-凝血酶,是血液凝固途径中的关键酶。它负责将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,形成血凝块的基础。Recombinant Canine ICAM-1/CD54 Protein,His Tag
透明质酸酶,英文名称Hyaluronidase,一类能够降低体内透明质酸活性的酶的总称,结构上由4个相同亚基构成,每个亚基分子量接近14kDa,该酶是一种糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上该酶可随机裂解透明质酸、软骨素和硫酸软骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷键。常与胶原酶联合使用于降解细胞外基质,从而从组织中分离活细胞。本品来源于牛睾丸,活力值为400–1,000units/mg,合适的pH值为4.5–6.0。产品性质中文别名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶英文别名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS号(CASNO.)37326-33-3来源(Source)牛睾丸分子量(MolecularWeight)~55kDa类型(Type)I-S外观(Appearance)淡黄色至米黄色至褐色粉末Recombinant Canine ICAM-1/CD54 Protein,His Tag
在PCR实验中,除了BsuDNAPolymerase,还有几种聚合酶适合高温扩增,包括:1.**TaqDNAPolymerase**:这是常用的PCR聚合酶,来源于Thermusaquaticus,能够在72°C的比较好活性温度下工作。它具有良好的热稳定性,可以承受PCR的热变性步骤,且中途不需要再添加酶。2.**PfuDNAPolymerase**:来源于Pyrococcusfuriosus,具有出色的热稳定性和3'→5'外切酶活性,提供校正功能,适用于对PCR保真性要求较高的实验,如基因筛选、克隆表达、突变检测、定点突变等。3.**VentDNAPolymerase**:来源于Litora...