Recombinant Human PODXL2 Protein

大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质，由于只需要简单的培养基和条件，因此费用低且方便。此外，除了无细胞表达，它是速度的系统，大肠杆菌倍增时间（约20min）比酵母（2h）、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说，在大肠杆菌中表达重组蛋白包括：1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌；2.培养细胞至对数生长期；3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后，相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的，以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类：E．coliRNA聚合酶转录的载体在蛋白质工程领域，泛素蛋白可以作为一种标签或融合蛋白，用于提高目标蛋白的可溶性、稳定性或功能性。Recombinant Human PODXL2 Protein,His Tag

α-凝血酶（α-Thrombin）是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶，由凝血酶原（Prothrombin，II因子）经蛋白水解活化而来。它在凝血过程中起着非常重要的作用，不仅能够促使纤维蛋白凝块的产生，还负责提供反馈信号来寻找前辅因子：V因子和VIII因子。也可以用作血管收缩剂。在体内，活化的X因子（FactorXa）切割凝血酶原，释放出活性肽并将凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一条轻链（Achain）（Mw~6,000）和一条重链（Bchain）（Mw~31,000）通过二硫键连接而成。某些情况下，α-凝血酶会发生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由对α-凝血酶A链水解并切割含有B链糖基化位点的小片段（B1，B2）组合而成。除了用于凝血研究之外，α-凝血酶还常用来位点特异性切割融合蛋白。基因重组时将凝血酶识别位点插入在目的蛋白与利于后续纯化和/或表达的多肽或者蛋白之间，通过凝血酶切割表达的重组子即可释放目的蛋白。凝血酶本身可通过亲和层析技术快速去除。本品是由匀质化的人凝血酶原经由Xa因子，Va因子和磷脂活化而得，经SDS-PAGE检测确保凝血酶原的完全活化，并以NIH凝血酶的标准品为参考，提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。Recombinant Mouse FOLR1 Protein,His Tag在蛋白质表达体系中，肠激酶常用于切割融合标签，从而释放出目的蛋白，特别是在pET表达系统中。

标题：牛凝血酶（Bovine Thrombin）的高比活应用及其在生物医学研究中的重要性摘要牛凝血酶（Bovine Thrombin），一种高比活度的丝氨酸蛋白水解酶，具有>2000 IU/mg的特异性活性，广泛应用于生物医学研究和临床，本文综述了牛凝血酶的分子特性、在血液凝固中的作用机制以及其在科研和工业生产中的应用。引言牛凝血酶是从牛血浆中提取的酶，分子量为37KD，由两条肽链（31KD和6KD）通过二硫键组成。作为凝血过程中的关键酶，牛凝血酶催化纤维蛋白原（fibrinogen）水解，形成纤维蛋白单体，进而促进血凝块的形成。由于其高度的序列专一性和水解效率，牛凝血酶不仅在生理止血中发挥作用，也作为分子生物学研究中的工具酶。材料与方法产品性质分析：分析牛凝血酶的CAS号、分子量、比活度、外观和纯度等物理化学性质。运输和保存方法：评估牛凝血酶的运输条件和长期储存稳定性。使用方法：探讨牛凝血酶在不同实验条件下的溶解、复溶和消化条件。

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义（UnitDefinition）1个酶活力单位指在10μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存，有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1）在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白（1-20μg），至终体积10μL；2）100℃温度下煮沸10min使其变性，冰上冷却，离心10秒；3）加入2μL的Buffer2、2μL的10％NP-40、6μL去离子水，总反应体积20μL；4）加入0.2~0.5μL的PNGase，轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1）在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白（1-20μg）至体积为20μL。2）加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3）37°C孵育4-24h。注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。酵母重组表达N-糖苷酶F（PNGase F）是一种通过酵母重组表达系统生产的酶。

利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato，CPI)活性多肽基因，克隆于表达载体pGEX一4T一1的多克隆位点中，得到重组质粒pGCPI，测序后将重组质粒转化到受体茵EscherichiacoliBL21中。重组茵经IPTG诱导表达，超声波破茵后，通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白，纯度大于97％。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽一S一转移酶后得到纯度大于98％的重组CPI，ELISA鉴定产物具有免疫原性，体外检测表明其促进纤溶的生物功能与天然CPI无明显差异。α-凝血酶在肝脏中作为非活性前体-凝血酶原合成，在凝血级联反应中被启用，这种活性酶由285个氨基酸组成。Recombinant Mouse Nectin-4 Protein,His Tag

CB1受体包含多个跨膜α-螺旋结构域，这些结构域使得受体能够嵌入细胞膜中。 它具有七个跨膜区域。Recombinant Human PODXL2 Protein,His Tag

ERBB3,又称HH3(人表皮生长因子受体3),是一种I型膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受体ERBC家族的成员。ERBP家族成员作为表皮生长因子(LU)家族的生长因子的受体。在ERBP家庭成员中,因为它含有一个缺陷的激酶域。ERBB3在角化细胞、黑色素细胞、骨骼肌细胞、成肌细胞和雪旺细胞中都有表达。单体ERbb3是一种低亲和性的受体。ERBB3与ERBB2的异聚反应形成高亲和性受体复合物。与此相反,ERBB3同向聚合或异向聚合形成了一个低亲和性的结合物。因为ERBB3含有一个有缺陷的激酶域,ERBB2的激酶域负责通过异二重瓣受体启动酪氨酸磷酸化信号。研究发现,ERBB3细胞质区内的三个离散氨基酸信号对ERBB2的转导至关重要。ERBB3的细胞质域也包含6个一致的结合主题,用于调节P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2领域,以及一个丰富的一致的结合主题。ERBB3的细胞质域也包含6个一致的结合主题,用于调节P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2领域,以及一个丰富的一致的结合主题。ERBB3的细胞质域也包含6个一致的结合主题,用于调节P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2领域,以及一个丰富的一致的结合主题。表达区间及表达系统重组的人HR3/ERBB3蛋白表达自于C-端的HK293细胞和AVI标记。里面有血清20-Thr643。分子量大约71.6Recombinant Human PODXL2 Protein,His Tag