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Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。泛素蛋白(Ubiquitin,简称Ub)是一种在真核细胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。Recombinant Human TRAIL R2/DR5/TNFRSF10B Protein,His-Avi Tag

Recombinant Human TRAIL R2/DR5/TNFRSF10B Protein,His-Avi Tag,标准物质

重组酶聚合酶扩增技术(RecombinasePolymeraseAmplification,简称RPA)是一种核酸扩增技术,能够在等温条件下快速检测特定DNA序列。这项技术以其快速、灵敏度高、特异性强、对设备要求低等优点,在临床快速诊断、食品检测、防控、工业应用、现场实时检测等领域具有广泛的应用潜力。**技术原理**:RPA技术主要依赖于几种关键的酶和蛋白质:-**重组酶**:能够识别并结合到单链核酸(寡核苷酸引物)上。-**单链DNA结合蛋白(SSB)**:与被置换的单链DNA结合,防止其重新结合形成双链。-**链置换DNA聚合酶**:在引物定位同源序列后,进行链延伸,实现DNA的指数增长。RPA的工作原理是,重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。**技术优势**:-**快速性**:RPA可以在37-42°C的等温条件下快速完成核酸的扩增,通常在10到30分钟内即可完成。-**灵敏度和特异性**:RPA能够检测低至单拷贝的核酸模板,并具有高特异性。

Recombinant Cynomolgus PD-L1/B7-H1 Protein,hFc Tagα-凝血酶不仅在凝血中起作用,还在细胞信号中发挥作用。它可以启动血小板并刺激炎症介质的产生。

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表达与纯化:重组抑肽酶在大肠杆菌中得到了高效表达,并通过纯化过程获得了纯度达到95%以上的产品。活性验证:重组抑肽酶展现出与天然抑肽酶相似的酶学性质,能够有效抑制胰蛋白酶的活性。稳定性测试:重组抑肽酶在推荐的储存条件下(-20ºC至2-8ºC)具有长达24个月的稳定性。讨论生产优势:大肠杆菌表达系统具有成本低、表达速度快、易于扩大生产等优点。此外,重组抑肽酶无动物源性,减少了病毒污染的风险,提高了产品的安全性。科研应用:重组抑肽酶可广泛应用于科研领域,如蛋白纯化、细胞培养、分子生物学实验等,提供了一种稳定且可靠的实验工具。工业生产:在工业生产中,重组抑肽酶可用于重组蛋白药物的生产过程中,防止蛋白酶降解,提高产品纯度和产量。结论大肠杆菌表达的重组抑肽酶具有高纯度、高活性和良好的稳定性,是一种理想的科研和工业用蛋白酶抑制剂。其无动物源性和高生产效率的特点,为生物技术领域提供了一种安全、经济的替代品。

重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达活性,但在pH6.0-8.5和温度4-30℃范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。产品性质来源(Source)大肠杆菌外观(Appearance)无色透明液体比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定义(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。纯化(Purification)Ni柱亲和纯化纯度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)产品组分运输与保存方法冰袋运输。透明质酸的生产可以通过动物组织提取、微生物发酵或化学合成等方法进行。

Recombinant Human TRAIL R2/DR5/TNFRSF10B Protein,His-Avi Tag,标准物质

RecombinantBiotinylatedCynomolgusSiglec-10Protein,His-AviTag性能参数分子别名(Synonyms)SLG2;SIGLEC10;MGC126774;PRO940表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedCynomolgusSiglec-10ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminus.ItcontainsThr17-Asn552.[Accession|A0A2K5WBX8]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.71kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-82kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutionin25mMMES,150mMNaCl,0.5MArginine(pH5.0).储存条件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.全长跨膜蛋白CB1它通过与G蛋白的相互作用,调节细胞内的第二信使系统,如cAMP水平。Moth Cytochrome C (MCC) (88-103)

泛素化可以是单泛素化,也可以是多泛素化或多聚泛素化,这取决于靶蛋白上连接的泛素分子的数量和方式。Recombinant Human TRAIL R2/DR5/TNFRSF10B Protein,His-Avi Tag

dGTPSolution(脱氧鸟苷三磷酸溶液)在分子克隆中扮演着重要角色,主要应用包括但不限于以下几个方面:1.**DNA合成**:dGTP作为DNA聚合酶的底物之一,在分子克隆中用于合成新的DNA链,特别是在PCR扩增和cDNA合成中。2.**PCR扩增**:在常规PCR和高保真PCR中,dGTP提供必要的核苷酸,以确保目标DNA片段的准确复制。3.**cDNA合成**:在从mRNA模板合成cDNA的过程中,dGTP是合成互补DNA链的关键成分。4.**DNA测序**:dGTP也用于Sanger测序等DNA测序技术中,帮助合成测序反应中的DNA链。5.**质粒构建**:在质粒或其他载体的构建过程中,dGTP可能用于填补缺口或连接DNA片段。6.**引物延伸**:在引物延伸反应中,dGTP用于延伸引物,以合成完整的DNA链。7.**DNA标记**:dGTP可以用于DNA片段的标记,便于后续的克隆和检测。dGTPSolution通常以100mM的浓度提供,以便于在实验中根据需要进行稀释。在使用时,应确保产品具有高纯度、无DNase和RNase污染,以保证实验的准确性和重复性。此外,dGTPSolution应储存在-20°C的条件下,避免反复冻融,以保持其稳定性。Recombinant Human TRAIL R2/DR5/TNFRSF10B Protein,His-Avi Tag

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PrP (106-126) 2025-12-28

在生物技术的微观世界中,限制性核酸内切酶是基因工程的关键工具之一,而 AluI 则是其中一位“微雕大师”。它以其独特的识别序列和切割方式,在基因工程、分子生物学研究以及遗传学等领域发挥着重要作用。AluI 的识别序列是“AG^CT”,这一序列在基因组中相对常见,使得 AluI 能够在多个位点进行切割。它会在识别到该序列后,在“^”标记的位置将 DNA 链切断,产生黏性末端。这种切割方式使得 AluI 在基因克隆和重组 DNA 构建中具有独特的优势。在基因工程中,AluI 的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过 DNA 连接酶将切割后的基因片段与载体 DN...

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