Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。去氧胆酸盐琼脂培养基中含有去氧胆酸盐,这是一种天然的胆酸盐,能够抑制大多数革兰氏阳性菌的生长。嗜盐菌选择性琼脂培养皿
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。哥伦比亚琼脂平板通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。
亚硫酸铋(BS)琼脂培养基是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性分离培养。它遵循GB/SN/USP标准,包括中国国家标准(GB)、中国出入境检验检疫行业标准(SN)和美国药典(USP)。**成分**:亚硫酸铋琼脂培养基的配方通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖、硫酸亚铁、磷酸氢二钠、柠檬酸铋铵、亚硫酸钠、煌绿和琼脂等。pH值一般调节至7.5±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖提供能源;亚硫酸铋指示剂抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长;磷酸氢二钠作为缓冲剂;硫酸亚铁用于产生硫化氢,并与铁产生沉淀,使阳性培养物为具有金属光泽的棕色到黑色菌落;琼脂作为凝固剂。**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入指定量的蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至适宜温度后倾注平板或试管中,用于接种样品。**培养特征**:沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂上生长时,由于其代谢特性,能够将亚硫酸盐还原成硫化物并与硫酸亚铁反应,使得菌落呈黑色,并可能表现出金属光泽。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。结晶紫中性红胆盐琼脂培养皿是一种常用的选择性培养基,用于微生物学实验室中对肠道病原菌的检测和分离。
三糖铁琼脂培养基(TSI)是一种生化培养基,用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选,其特点如下:1.**用途**:TSI培养基用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、葡萄糖、蔗糖、酚红、硫酸亚铁铵、硫代硫酸钠和琼脂,pH值控制在7.4±0.1(25℃)。3.**检验原理**:乳糖、葡萄糖和蔗糖作为可发酵糖类,其发酵产酸时通过酚红指示剂测出,酸性呈黄色,碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢,与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁沉淀;氯化钠维持渗透压;琼脂作为凝固剂。4.**应用**:TSI培养基特别适用于沙门氏菌等肠道致病菌的分离鉴定,通过观察细菌在培养基中的生长情况、颜色变化和硫化氢产生等特征进行鉴定。5.**使用方法**:称取培养基64.5g,溶解于1000ml蒸馏水中,加热煮沸1分钟,分装于试管,121℃高压灭菌15分钟制成高层斜面。6.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如大肠埃希氏菌和乙型副伤寒沙门氏菌,观察其生长情况和特征性反应。7.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。改良Letheen琼脂培养基的配方进行了调整,以适应更多的微生物生长需求。KF链球菌琼脂培养皿
通过调整成分比例,改良的Letheen琼脂培养基提高了对不同微生物的适应性,增强了其抑菌效果和生长因子。嗜盐菌选择性琼脂培养皿
连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,TTB)是一种用于分离和富集沙门氏菌的选择性富集培养基。它通常包含胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙、硫代硫酸钠等成分。这种培养基通过提供特定的营养和抑制剂,有助于沙门氏菌的生长,同时抑制其他杂菌。以下是一些关于连四硫酸盐肉汤培养基的基础配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-动物组织消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-胆盐(BileSalts):1.0g-碳酸钙(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸钠(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化钾(PotassiumIodide):根据具体配方调整2.**配制方法**:-称取适量的培养基粉末,加入去离子水或蒸馏水。-加热煮沸以确保所有成分完全溶解。-分装至适宜的容器中,并进行高压灭菌。3.**使用说明**:-接种样品后,培养基可以在35°C或43°C下培养12至24小时。-培养后,可以将培养物接种到其他选择性培养基上,如XLD琼脂、亚硫酸铋琼脂、SS琼脂等,以进一步分离和鉴定沙门氏菌。嗜盐菌选择性琼脂培养皿