品红亚硫酸钠液体培养基(EndoAgar),也称为远藤琼脂培养基,是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于饮用水和水源中总大肠菌群的选择性分离和确证,符合GB(中国国家标准)的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氢二钾:3.5g-乳糖:10.0g-琼脂:13.0g-碱性品红:1.0g-亚硫酸钠:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和矿物质。-乳糖作为可发酵的糖类,用于检测细菌的乳糖发酵能力。-亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色。-发酵乳糖的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落。-快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明菌落。**使用方法**:-称取本品52.5g,加入20mL无水乙醇和980mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热搅拌溶解。-按需分装,116℃高压灭菌20分钟,备用。-质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成。-取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中。-将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱,于36±1℃需氧培养24±2小时,观察实验结果。马铃薯浸出液琼脂培养皿可以更好地维持微生物的多样性,有利于保留微生物的天然群落结构。酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂平板
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。MiddleBrook7H10琼脂预装培养皿大肠杆菌在DC培养基上产生典型的反应,表现为产生黑色素沉淀。
马铃薯葡萄糖琼脂(PotatoDextroseAgar,简称PDA)是一种使用的微生物学培养基,特别适合于菌的培养,尤其是酵母和霉菌。以下是PDA培养基的一些特点:1.**成分**:PDA主要由马铃薯浸出液、葡萄糖和琼脂组成。马铃薯提供了丰富的营养物质,葡萄糖作为碳源,琼脂则作为凝固剂。2.**pH值**:PDA的pH值通常调整至5.6±0.2(25℃),以优化菌的生长条件。3.**用途**:PDA被用于食品和乳制品中酵母和霉菌的平板计数,也适用于从临床样本中培养酵母和霉菌。它对于保存某些皮肤菌的菌种库也非常有用。4.**选择性**:PDA可以通过添加酸或抗生物质(如氯霉素、酒石酸和四环素)作为选择性抑制剂来抑制细菌生长,从而促进菌生长。5.**结果解读**:在PDA上,酵母菌通常形成乳白色至白色的菌落,而霉菌则长成各种颜色的丝状菌落。不同菌在PDA上展现出独特的菌落形态特征,如颜色、质地及结构,这对于初步识别菌种至关重要。6.**局限性**:虽然PDA能有效支持多种酵母和霉菌的生长,但为了获得菌种的完整鉴定,建议对纯培养菌落进行生化、免疫学、分子生物学或质谱分析等进一步的测试。7.**储存条件**:PDA应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存,以保持其有效性。
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基是一种专门用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培养基,具有以下特点:1.**荧光检测**:MUG作为荧光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后产生蓝色荧光终产物,可通过紫外线监测。2.**应用广**:MUG培养基用于荧光检测大鼠体内的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表达,也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表达进行荧光检测。3.**产品特性**:MUG具有纯度≥99%,熔点102°C,分子量为352.29(无水基础),在冷冻(-20℃)条件下储存。4.**培养基配方**:包含蛋白胨、磷酸盐缓冲系统、硫酸锰、亚硫酸钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、氯化钠、氯化钙和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步骤**:包括称取培养基粉末溶解、分装、灭菌、接种质控菌液、培养和观察有无荧光等步骤。6.**试验现象**:接种大肠埃希氏菌等质控菌株,在30-35℃培养后,通过366nm紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。7.**安全性**:操作MUG时应穿实验服并戴一次性手套,以确保安全。8.**应用示例**:包括细菌培养物的荧光检测和转基因植物GUS基因的表达测定。9.**储存与运输**:MUG培养基应-20℃干燥保存,有效期2年,运输时使用冰袋。EMB培养基成为鉴定肠道细菌的一种常用工具,特别是在食品卫生和临床微生物学方面。
营养琼脂培养基是一种常用的微生物培养基,具有以下特点:1.**成分丰富**:由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和琼脂等成分组成,为微生物提供氮源、碳源、维生素、氨基酸和其他生长因子。2.**pH值适宜**:pH值通常控制在7.0-7.4之间,适合大多数细菌和部分菌的生长。3.**凝胶性质**:含有琼脂作为凝固剂,使得培养基在冷却后形成凝胶状,便于微生物在表面形成菌落。4.**用途广**:适用于多种微生物的培养、分离和鉴定,包括细菌、酵母和霉菌。5.**易于操作**:琼脂培养基易于倒板和制备平板,适合实验室常规使用。6.**稳定性好**:在适当的储存条件下,营养琼脂培养基可以长时间保持其性能。7.**观察方便**:菌落形成在琼脂表面,便于观察和计数,也方便进行菌落挑选和纯化。8.**无菌操作**:在制备和使用过程中需要严格的无菌操作,以避免污染。9.**质量控制**:培养基的质量通过检验原理和微生物灵敏度试验进行控制,确保其稳定性和有效性。10.**执行标准**:营养琼脂培养基的制备和使用遵循相关标准,如GB4789.28-2013《中华人民共和国食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》等。与传统琼脂培养基相比,马铃薯浸出液琼脂培养皿中的微生物生长速度更快,菌落形态更为清晰。改良亚硫酸盐琼脂平板
VRBA培养基的主要成分包括琼脂、胆盐、溴青紫红(Violet Red Bile)、乳糖等。酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂平板
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专为梭菌属(Clostridium)细菌设计的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐,这些成分提供碳源、氮源、维生素和生长因子,适合梭菌的生长需求。2.**pH值**:RCM培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,通过高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂平板